5. 然后液体经过压力传感器 (4)
通过装在pH流动池的pH
电极,电导池和UV流动池。柱前和柱后的压力传感器
持续检测层析柱进口和出口的压力,屏幕上显示出不同
的压力读数和变化中的压力曲线。
6. 液体继续流到出口阀 (V8+V9),出口阀用于转换液体到废液或分部收集器。
放大生产
快速探索功能 (scouting) 使工艺开发和优化变得自动化。例如,ÄKTAexplorer 100用UNICORN开发和优化在E.Coli
中表达的酪氨酸磷酸酶1B蛋白 (PTP 1B) 的纯化方案,同样三个步骤 (粗提,中度纯化和精细纯化) 的纯化方案可用在ÄKTApilot放大生产。
在放大生产中,上样浓度 (mg蛋白/ml凝胶) 和线性流速保持不变。用于粗提步骤的凝胶是Q SepharoseTM
XP。中间产物的纯化用Phenyl Sepharose High Performance的疏水作用层析凝胶完成。在用SOURCETM
30Q进行精细纯化之前,所收集的部分用SephadexTM G-25F进行脱盐。最后,在ÄKTAexplorer
100和ÄKTApilot系统上分别得到回收量为0.132 g和3.5 g的PTP 1B。层析图谱显示纯化方案在ÄKTApilot上高度重复。
符合GLP和cGMP标准
ÄKTApilot的灭菌效率经受了灭菌程序的测试,系统用包括由美国药典United States Pharmacopoeia
(USP 25) 推荐的三个细菌系和一种通常用于生产环境的酵母菌系的溶液感染系统。USP 25要求菌落形成单位呈log
6减少。 |