在本文中，我想扼要介绍我们研究所如何实ÄKTAFPLC系统在购买和集中管理应用方面的经验。我同样要讲述如何利用这个系统是去适应全所众多的、各种不同需要的工作。提供这些实例以说明该系统的多功能用途以及它如何能满足多种研究课题的需求。
历史背景
象许多研究所一样，Insititute de Genetique et Microbiologie (IGM)
的许多大型仪器都是公用的，这就需要小心选择和管理。因为这些仪器设备必须为不同需求的许多课题组服务。目前，IGM的大部分实验室都需要一些生物分子纯化设备。包括抗血清生产，纯化活性酶用于体外分析和蛋白质结构研究等。 |
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图1. (A) 用SuperdexTM 200 HR10/30做凝胶过滤层析，分部收集P.Iuminescens培养物上清。缓冲液A：50
mM Tris-HCl, 155 mM NaCl (pH8.0)。(B) 从(A) 含蛋白酶活性峰部分的HIC探索。结果表明，不论RESOURCE
Eth还是RESOURCE Iso都能满足要求。蛋白酶活性以条型图显示。缓冲液A：50 mM Tris-HCl,
155 mM NaCl (pH 8.0),1M (NH4)2SO4 (pH 8.0); 缓冲液B：50 mM
Tris-HCl (pH 8.0) mAU 扫描：蓝=RESOURCETM Eth; 棕=RESOURCE
Iso; 紫=RESOURCE Phe；蛋白酶活性; 绿=RESOURCETM Eth; 黄=RESOURCE
Iso; 红线=电导；橙线= % 缓冲液B。(C) 最后在Mono Q HR5/5柱上用从(B) 的峰部分精纯分子量为53,000的蛋白酶。缓冲液A：
50 mM Tris-HCl, (pH 8.0); 缓冲液B：50 mM Tris-HCl, 1 M NaCl
(pH 8.0)。蓝线=mAU扫描；红线=电导；橙线= % 缓冲液B。 |
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鉴于对蛋白质进行纯化的要求日益增长，IGM意识到需要一种更小巧，专用，多功能和集中管理的“纯化工作站”。以往的低压组合层析系统已不能有效和可重复地纯化蛋白质了。所以，IGM决定购买ÄKTAFPLC作为一个集中应用系统，以满足研究所在中等纯化和精制方面的需求。
系统配置
ÄKTAFPLC超越其它系统的一个优点是它的部件结构。它允许用户选择性增加进口阀，样品泵，缓冲液和层析柱，检测器，混合器，空气传感器。系统能特别好地适应逐步发展的需求及预期目标。
IGM的ÄKTAFPLC系统购买了以下配置： |
| 核心“主体”部件 |
| P _ 920泵 |
两个高精度双注射泵；梯度混合器 |
| UPS _ 900监测器 |
对UV，pH, 电导和温度做在线监测 |
| 附加的“模块”部件 |
| 2 X IV _ 980阀 |
每个阀具有8个出入口供P _ 920泵选择不同缓冲液 |
| 2 X PV _ 908阀 |
每个阀提供供7个单独柱和一个安全旁路用 |
| M _ 925混合器 |
通用混合器，容量可变 |
| 上样口 |
自动上样阀 |
| INV _ 907 |
可更换的上样环 (Injection loop) 和上样杯(Superloop) |
| Frac 900/901 |
自动分部收集器用FV _ 903阀分开样品、废液 |
| 全自动分部收集器 |
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| 监测仪 |
UV (280 + 254 nm)、pH、电导、温度、压力 |
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