欧易生物结合多年构建文库的经验,现有酵母双杂交文库、SSH差减文库、cDNA文库构建。在文库构建流程(CLONTECH专利的BD Matchmaker™ library)基础上加入独特步骤,使文库中高丰度表达基因明显降低,从而使筛选时假阳性率明显降低,为您的科研提供更多的便利!
均一化文库
欧易生物发展了均一化cDNA文库技术,均一化c库是克服基因转录水平上巨大差异给文库筛选和分析带来障碍的有效措施,有利于研究基因的表达和序列分析。我们基于双链特异性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease, DSN)的先进cDNA文库均一化技术,能减低高丰度表达基因10-100倍,有效富集低丰度表达基因,从而降低冗余率。
文库特点:
■ 材料用量少,只需1ug总RNA;
■ 无需反复杂交过程,均一化程度高;
■ 均一化后平均插入片断大小无明显变化;
■ 均一化后,减低高丰度表达基因10-100倍。
作为国内cDNA文库构建的主流服务供应商,在长期稳定的实验服务过程中积累了丰富的经验,我们已经成功构建的cDNA文库涉及如下材料:
酵母双杂交文库
特点与优点:
酵母双杂交系统检测蛋白之间的相互作用具有以下优点:
- 相互作用的信号是在融合基因表达后,在酵母细胞内重建完整的转录因子结构的作? 用而给出的,省去了纯化蛋白质的繁琐步骤;
- 检测在真核活细胞内进行,可以在一定程度上代表研究材料细胞内真实情况;
- 检测的结果可以是基因表达产物的积累效应,因而可检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用;
- 酵母双杂交系统可采用不同组织、器官、细胞类型和分化时期材料构建cDNA文库,能分析细胞浆、细胞核及膜结合蛋白等多种不同亚细胞部位及功能的蛋白。可以用来比对病变组织,更快的找到突变基因或者导致变异的蛋白,更快的找到攻克方向;
- 利用研究的已知蛋白基因为诱饵,在已经构建好的某组织材料特异表达的cDNA酵母AD文库中钓取可能的互作蛋白;
- 采用Yeast mating策略,实现酵母AD文库使用的反复性,在大规模高效筛选的同时缩减了研究成本。
SSH差减文库
抑制性消减杂交(SSH)文库是一项可以快速获取两个不同生物材料中差异表达基因的分子生物学技术,是快速筛选差异表达基因的有效方法,也是寻找新基因的重要手段。该技术尤其适合以genome尚不完全清晰的物种为研究对象的科研工作者,或以特殊生物材料为研究对象的科研工作者。
特点:
1.快速获取两个不同生物材料中差异表达基因
2.可以获得EST序列,然后定制earray芯片
3.实验周期短,服务稳定
作为国内cDNA文库、均一化cDNA文库、酵母双杂交文库等各类转录组文库构建的主流服务供应商,我们已经成功构建的各类文库已经覆盖动植物,微生物等40多个物种,涉及到的材料如下:
动 物:
人、大鼠、小鼠、猪、牛、山羊、兔、狗、鸡、猴、鹅、蟹、鲫鱼、多宝鱼、对虾、壁虎、天牛、昆虫、线虫、蚜虫等。涉及到的组织部位包括肾脏、脑、腮、脾、输精管、肠、心脏、输卵管、肝脏等以及各种培养的细胞。
植 物:
拟南芥、水稻、玉米、棉花、大豆、小麦、油菜、甘蓝、白菜、黄瓜、西瓜、地瓜、牡丹、菊花、莲藕、番茄、香蕉、银杏、茶、槟榔、荔枝、木薯、百合、土豆、草、江蓠、紫菜、苹果、松针、红树等。涉及组织部位包括整株小苗,不同发育时期的种子、胚、胚乳,不同发育时期的花、雄蕊、雌蕊,不同发育时期的顶端分生组织,叶、根尖、穗及近期本司新做的杉木物种等。
微生物:
环境微生物、肠道微生物、禾谷镰刀菌、口腔病菌等。
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