一、简介
质粒是基因治疗的另一种载体，称为基因疫苗。基因疫苗又称为核酸疫苗 (nucleic acid vaccine)， 是指将编码某种抗原的外源基因与质粒载体重组，构建出真核表达载体，通过肌肉注射等途径直接导入动物细胞后，能利用宿主细胞的蛋白质合成系统合成外源抗原蛋白，并诱导宿主细胞产生对该抗原的体液和细胞免疫应答，以达到预防和治疗疾病的目的。由于一般的基因疫苗只含有DNA成份，因此，基因疫苗又常称为DNA疫苗 (DNA vaccine)。由基因疫苗诱导机体产生的免疫应答，称为基因免疫 (gene immuniza-tion) 或核酸免疫 (nucleic acid immunization) 或DNA免疫 (DNA immunization) 1。

质粒DNA与重组病毒相比更简便、更易操作，在质粒中加入病毒的复制子，质粒即可指导质粒在靶细胞中扩增。质粒有以下特点：简易操作、插入更大的序列、易放大生产、整合和扩散的危险性小。2002年美国专利局批准了Copernicus Therapeutics公司非病毒游离质粒基因载体技术的专利，这项专利将大大拓展基因治疗在癌症治疗领域的应用。

二、质粒纯化的新方法
Amersham Biosciences公司推出一种新的凝胶 ——
PlasmidSelect，对超螺旋DNA有特异的吸附。是目前市面上最专门、最有效分离超螺旋DNA与开环DNA及其它杂质的方法：

第二步： PlasimdSelect特异吸附超螺旋DNA (ccc)
PlasimdSelect是一种以Sepharose 6FF为基架的凝胶，在Sepharose 6FF上共价结合2硫基嘧啶。这种凝胶在2M硫酸铵条件下，特异结合ccc，不与oc结合。从而提高ccc的纯度。

层析柱： PlasmidSelect XK16/20 CV=24ml
缓冲液： 平衡及上样缓冲液2M (NH₄)₂SO₄; 10 mMEDTA;
100 mMTriscl pH 7.0
洗脱缓冲液：1.4 M Nacl; 2M (NH₄)₂SO₄; 10 mMEDTA;
100 mMTriscl pH 7.0
上样： Sepharose 6FF纯化的质粒，上样量0.4 mg/ml

上样后，以洗脱缓冲液洗脱超螺旋质粒DNA，而在上样过程中，开环的DNA没有与凝胶结合，见图2。