普洛麦格中文通讯 2002年第五期
 
 
 
Promega公司TNT® 系统体外转录/翻译反应的模板(数据没有显示)。特别是TNT® Quick 和 TNT® T7 Quick for PCR DNA系统需要采用线性DNA模板。 

与竞争者的比较分析：
　　我们比较了Wizard® SV 凝胶及PCR纯化系统和Q's凝胶及PCR纯化试剂盒纯化不同长度DNA片段的

纯化效率，Wizard® SV 凝胶及PCR纯化系统相似或优于竞争者Q's试剂盒(表5)，并且用两个系统纯化的DNA功能性具有可比性(数据没有显示)。

一般每个纯化离心管可用于纯化350mg的凝胶块，而SV小柱可容纳3.5g溶化的琼脂糖凝胶，相当于10个350mg的1%琼脂糖凝胶块。用Wizard® SV柱从1，2，5或10个凝胶块中纯化等量DNA，纯化产率及纯化产物的功能没有差异(数据没有显示)。这种 系统对纯化回收多上样孔的单一DNA片段或比较大的凝胶块是有优势的。相比而言，竞争者Q's凝胶纯化 试剂盒说明书建议其每个离心管琼脂糖凝胶不能大于400mg，当纯化凝胶块比较大的DNA片段时，需要采
图4：从350mg 1％琼脂糖/TAE胶条中纯化的1000bp PCR产物采用ABI BigDye® 终止试剂的测序图谱。
用很多纯化管，而且需将洗脱的DNA汇合并可能用乙醇沉淀方法浓缩DNA，操作费时且离心易导致DNA损失。
 
　　另外，一个SV小柱可容纳高达1ml的扩增反应产物，因而采用该系统可浓缩PCR产物或纯化体积大的扩增反应产物。相反，竞争者Q's PCR纯化试剂盒每个小柱最多仅能容纳100μl扩增反应产物。另外对于 10μl PCR反应产物，Wizard® SV 凝胶及PCR纯化系统也可成功进行纯化。

结论：
　　Wizard® SV凝胶及PCR纯化系统用于纯化标准或低熔点琼脂糖凝胶中回收的DNA片段及直接纯化扩增反应的PCR产物。该系统操作简单，可有效纯化100bp-10kb的DNA片段，回收率70-95％。纯化产物 适用于很多下游应用。

致谢：
　　衷心感谢Mindy Bennett,Lydia Hung,Travis Gille, Renee Zielinski,Gary Shiels,Terru Grunst, Tracy Worzella,Paula Brisco,Steve Ekenberg, Jaqui Sankbeil,Randy Hoffman,以及Megan Buros给予的帮助。

参考文献
1. Ausubel,F.m.et al.ed.(2001)In:Current protocols in Molecular Biology, John Wiley and Sons,Inc., New York, 2.6.1.
2.Chakrabarti,R.and Schutt,C.E.(2002)Biotechniques 32,866-874.
3.Chakrabarti,R.and Schutt,C.E.(2001)Gene 274, 293-298.
4.Chakrabarti,R.and Schutt, C.E.(2001)Nucl.Acids Res.29,2377- 2381.

操作手册：
Promega公司Wizard® SV 凝胶及PCR纯化系统技术手册TB308 (www.promega.com/tbs/tb308/tb308.html)
内容编辑：美国普洛麦格公司北京办事处
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