化重为350mg 1%琼脂糖/TAE凝胶条,电泳检测纯化产物来计算的。每一凝胶条用一个柱。用较热的水
(65-80℃)洗脱DNA可提高大片段DNA的回收率。每个柱子可容纳高达40μg DNA,而凝胶条中少至10ng的DNA,用该系统也可成功纯化。
图3和表2显示了用直接纯化方法提纯的不同大小片段PCR产物的平均回收率。其中,100bp, 200bp,
500bp, 1,000bp, 和1,500bp PCR产物是用PCR Master Mix (产品目录号:M7501,M7502,M7505)制备,而3,199bp DNA产物是将pGEM®-3Zf(+)载体线性化提纯的,回收率由凝胶电泳分析。该系统能从扩增反
应产物中除去非结合的引物,石蜡油不会影响纯化。
Wizard® SV凝胶及PCR纯化系统对很多扩增酶、缓冲液及加强PCR添加剂均适用。我们检测了13种不同PCR添加剂对1000bp PCR产物纯化效率的影响(见表3),结果表明所有检测的添加剂均适用Wizard®
SV凝胶及PCR纯化系统直接纯化。 |