引言
纯化DNA片段是分子生物学的一种常用技术,纯化的DNA片段下游应用包括PCR、克隆、测序、限制性酶切及其它一些酶反应。DNA常采用电洗脱方法从
琼脂糖凝胶条中回收纯化,这种方法费时,并且得到的DNA浓度很低,需用乙醇沉淀方法进行浓缩。
Wizard® SV 凝胶及PCR纯化系统用于从标准或低熔点琼脂糖凝胶纯化长度100bp-10kb的DNA片段,缓冲系统采用TBE或TAE溶液,回收效率为70-95%。浓度高达3%的琼脂糖凝胶可成功地应用该系统进行
纯化,并且采用不同厂家的琼脂糖在操作上没有差异。另外采用低熔点和高熔点琼脂糖应用本系统纯化的 DNA在下游应用功能上也没有差异。
Wizard® SV凝胶及PCR纯化系统除了可用于凝胶回收纯化DNA外,也可直接纯化长度为100bp-10kb
的PCR产物,回收效率为80-95%。去除PCR反应中未掺入的核苷酸、引物及缓冲液对很多下游应用是必 需的或有益的。
该系统以膜为基础,可结合高达40μg DNA,DNA纯化所需时间依赖于样品数量,最少可在15分钟内完
成。纯化的DNA不需进行任何处理,可直接用于下游应用,包括自动荧光DNA测序、克隆、酶切或体外转 录及翻译。
Wizard® SV凝胶及PCR纯化系统的基础是在离液序列高的(chaotropic)盐存在时,DNA能够结合到硅膜上。对于凝胶纯化,需要将电泳后切下的DNA目的条带溶解到含 |