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Promega公司的CellTiter
96® AQueous单溶液检测系统以MTS四唑化合物为特征。MTS可被活性细胞转化为甲化合物(formazan)，这是一种能直接溶解于组织培养基中的深色化合物。应用CellTiter
96® AQueous单溶液检测系统中的试剂可以设计均质的高通量分析方法，来对细胞活力这个终指标进行监测
。本文应用该系统分析了一些化合物对病毒诱导的细胞病变效应(virus-in duced cytopathic
effect, CPE)的抑制作用，对这些化合物对一些不同种类病毒的抗病毒活性进行了评估。
前言
很多病毒在复制时，不仅破坏宿主细胞，而且可通过细胞病变效应(cytopathic effects,
CPE)破坏其周围未被感染的细胞。人们可以通过评估对病毒诱导细胞死亡的抑制效果来确定一些潜在治疗试剂的抗病毒活性。应用细胞基础上的CPE分析，我们开发了一种自动化、高通量的方法，对一些病毒的抑制剂进行了甄别，这些病毒包括人免疫缺陷病毒-1型(HIV-1)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、人疱疹病毒(HSV-1和HSV-2)及呼吸道病毒(表1)。应用这种分析方法，我们每周可筛选多至15,000个的针对某一病毒的化合物。这一高通量筛选方法也可用于确定可抗一系列不同病毒的潜在抗病毒试剂的活性。这个分析系统既可用于天然化合物，也可用于组合化合物库中的抗病毒化合物的快速筛选，因而缩短了药物开发与优化先导化合物之间的时间间隔。
高通量分析方案
细胞在96孔板上适当培养基中培养。自动化抗病毒分析在Beckman Coulter公司的SAGIANTM
核心系统上进行(图1)。实验设计为在每块培养板上测试24个化合物的单一浓度对目标病毒的抑制能力(图2)，每个样品孔中加入100
ml受试药物和100ml病毒悬液，每块培养板内均设有对照孔(表2)。将培养板置于37℃、含 5% CO2的潮湿培养箱中，培养至对照孔出现最大细胞病变效应(CPE)(见表1)。
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