瞬时RNAi
T7 RiboMAXTM RNAi表达系统是一个体外转录系统,可在短时间内转录毫克量RNA。产生的双链 RNA不含蛋白及其它杂质,适用于非真核细胞中进行RNA干扰(RNAi)。大多数非真核细胞中进行RNA
干扰时使用400bp或更长的dsRNA。T7 RiboMAXTM RNA表达系统可采用质粒或PCR产物为模板合成200bp和更长的dsRNA分子,产率>2mg/ml。
采用该系统时,使用者需准备从DNA模板合成的两条互补RNA链。转录反应后,RNA链可退火形成dsRNA。剩余的单链RNA及DNA模板用核酸酶消化除去。而后用异丙醇沉淀的方法纯化dsRNA,纯化的dsRNA可转入选择的细胞中进行RNAi应用。
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