一种进行干扰的新方法
预测一个对目标基因表达具有抑制效应的 siRNA是不可能的。所以对于每一个目标基因,常常筛选3-5个不同的siRNA。这种筛选可采用昂贵的RNA合成或费时的DNA克隆方法。而siLentGene
TM U6盒 RNA干扰系统可避免这些问题,可快速、简易地筛选多种siRNA序列。
siLentGeneTM U6 盒 RNA干扰系统包括在U6启动子序列和特异的U6聚合酶终止子的控制下,siRNA序列产生、纯化和转染所需的试剂。这种设计使带有推荐3'添加端的精确干扰性RNA能够转录。
该系统提供了U6 盒 DNA,在上游引物存在时它可作为PCR反应的模板,也可由使用者自备的下游引物进行PCR反应。下游引物包括3个部分:U6
盒式结合域、能转录特定siRNA序列区域和U6终止子序列。
结果产生的PCR产物,即U6表达盒包括U6启动子、目标序列或其互补序列及终止序列。使用该系统需要制备两
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