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2003年第4期




病毒基因转移系统

在哺乳动物细胞中表达基因是研究蛋白功能或表达、纯化真核蛋白的常用方法。如果用常规转染方法转染特定细胞效果欠佳,你会怎么办?Stratagene提供3套各有所长、有点突出的病毒基因转移系统,适合不同研究要求:
ViraPort 逆转录病毒基因表达系统和无辅毒AAV系统可以将目的基因整合到宿主细胞的基因组上以期长期研究。如果你想控制转导入一个细胞中的基因拷贝数,ViraPort系统是首选。AAV Helper-Free系统是免疫反应最小的研究的最佳选择。AdeasyTM XL腺病毒载体系统用于瞬时表达和短期研究,可以生产毫克级的蛋白并进行大量纯化。这三套系统都是质粒型的,比期它的系统更容易方便快捷、安全地构建和制备病毒。

Advantages of the AAV Helper-Free System
● Infects both dividing and non-dividing cells
● Integrates into host genome for stable expression
● Delivers gene to difficult-to-transfect cells
● Avoids purification steps needed with helper-adenovirus systems

AAV-2
腺相关病毒(AAV-2)是细小病毒家族中的一个小的,天然复制缺陷型单链DNA病毒。该病毒可以感染分裂期或非分裂细胞,整合到基因组DNA上得到稳定的细胞系。该病毒特别适合用于基因治疗治疗,被感染的动物将终身表达外源基因,而免疫反应几乎没有。Stratagene的无辅毒AAV系统是质粒系统,不需要辅助腺病毒帮助包装感染病毒颗粒,因此也不需要在转导或感染前纯化去除辅助腺病毒。


Advantages of the AdEasyTM XL adenoviral vector system

● High-level protein production for short-term Studies
● Infects both dividing and non-dividing cells
● Transient gene expression
● Rapid construction and packaging of viral

腺病毒
腺病毒是一种大的(36 kb)双链线性病毒,可以感染很多种类的哺乳动物或鸟类细胞和宿主。腺病毒可以感染处于分裂期或非分裂期细胞,高水平表达蛋白,而且真核蛋白可以得到正确地翻译后修饰。腺病毒不整合到宿主基因组,因此不会产生移码突变的问题。尽管本系统表达蛋白量较很理想,蛋白产物也具有正确的空间结构,蛋白在细胞中能进行后加工,但表达是瞬时表达,不能用腺病毒制备稳定细胞系。Stratagene的AdEasy XL腺病毒载体系统的最主要的改进在于:在E.cali中重组穿梭载体和腺病毒骨架载体,大大减少了生产和纯化病毒的操作时间和劳动强度。


Advantages of the ViraPort retroviral system

● Integrates into host genome for stable expression
● Transduction efficiency>90% with a high multiplicity of infection(MOI)
● Copy number can be controlled down to 1 insertion per cell by reducing MOI
● Functionally screen cDNA libraries in mammalian cells
● Many premade retroviral vector cDNA libraries available
● Use prepackaged ViraPort library and control supernatants for quick, easy screening
 

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