Amersham色谱园第14期

场上最高载量的组氨酸融合表达蛋白纯化凝胶和预装柱
Ni Sepharose High Performance & HisTrap HP column

每毫升粒径34 mm的Ni Sepharose High Performance凝胶可以结合最少40 mg 组氨酸融合表达蛋白，比市场上其他公司凝胶的普遍结合量16 mg/ml 高出2 倍多。已经挂好的Ni离子脱落情况也是最低，经过60柱体积的还原性缓冲液流洗后，Ni 离子脱落< 5%，其他公司普遍在18% 左右。

洗后，Ni 离子脱落< 5%，其他公司普遍在18% 左右。HisTrap HP 是Ni Sepharose High Performance 的预装小柱，可以用针筒或连接层析系统使用。为了满足结构基因组和蛋白质组的大量纯化需要，以获得结晶的蛋白质，特别备有100 支装提供给客户.

柱:       1) HisTrap HP 1 ml
           2) 1 ml column, dimensions (i.d. x h) 5 mm x 5 cm
凝胶:   1) Ni Sepharose High Performance
           2) Medium from supplier 'Q'
样品:             12 mg His-tagged Green Fluorescent Protein (GFP-(His)₆), E. coli extract
样品体积:       19 ml (clarified extract)
结合缓冲液:    20 mM sodium phosphate, 0.5 M NaCl,5 mM imidazole, pH 7.4
洗脱缓冲液:    20 mM sodium phosphate, 0.5 M NaCl,0.5 M imidazole, pH 7.4
梯度:             25 ml linear gradient of 5-250 mM imidazole,followed by a "push" with 500 mM imidazole