小干扰RNA分子(siRNA)已迅速成为一个通过抑制目的基因的表达来研究哺乳动物基因产物功能的强大的工具。通常这些短的,双链RNA分子(shRNA)是由体外产生且价格昂贵。采用Pol
III启动子在体内表达短发夹RNA(shRNA)是有效的降低基因表达一个更为经济的方法。Strtagene开发了GeneEraser
shRNA表达系统优化了shRNA的表达及基因的抑制。体外合成siRNA的方法尽管非常有效,但其抑制的持久性通常仅有5-7天,使之不能用来进行长期的基因抑制。而用体内表达短发夹RNA的方法,使不能持久抑制基因表达的问题迎刃而解。
shRNA 是怎样工作的?
产生dsRNA分子的另一个有效的方法是在体内表达一个短发夹RNA分子(shRNA)。这种shRNA包含两个由一个小环序列所分离的短反向重复序列,是由Pol
III启动子控制的。其中一个反向重复序列与目的基因互补。ShRNA随后被加工成siRNA,降解目的基因mRNA、抑制表达。
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