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2003年第4期
预制文库
货号
价格
T7Select 人脑cDNA文库
70637-3
US $ 849.5
T7Select 人乳腺cDNA文库
70638-3
US $ 849.5
T7Select 人结肠cDNA文库
70639-3
US $ 849.5
T7Select 人心脏 cDNA文库
70640-3
US $ 849.5
T7Select 人肝脏cDNA文库
70641-3
US $ 849.5
T7Select 人肺cDNA文库
70646-3
US $ 849.5
T7Select 人胃cDNA文库
70642-3
US $ 849.5
T7Select 人Alzheimer’脑DNA文库
70643-3
US $ 849.5
T7Select 人乳腺癌cDNA文库
70644-3
US $ 849.5
T7Select 人结肠肿瘤cDNA文库
70645-3
US $ 849.5
T7Select 人肝癌cDNA文库
70647-3
US $ 849.5
T7Select 人肝癌cDNA文库
70648-3
US $ 849.5

操作流程
T7 Select OrientExpress

第一天 合成cDNA第一链和第二链
cDNA平端化以便克隆
与接头连接
第二天 消化接头
cDNA按片段大小分区
(如需要还要切割制备载体臂)
将cDNA与载体臂连接
第三天 体外包装噬菌体
铺板,3+小时后挑噬斑
扩增文库
合计: 约3天

下一步:用PCR或亲合筛查筛选文库

 

T7Select cDNA克隆的亲和掏洗:

第一天 亲和掏洗配体固定化(如用96孔ELISA板)
进行第一轮亲和掏洗(将噬菌体裂解物与配体
孵育,TBST洗,洗脱结合的噬菌体
扩增洗脱的噬菌体(经1-3小时培养)
进行第二轮亲和掏洗
扩增洗脱的噬菌体
第二天 根据需要进行第三轮亲和掏洗
噬菌体扩增
根据需要进行第四轮亲和掏洗

 合计: 约2天


特点与优点