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2003年第4期

● 在BamHI位点下游紧连一个C使插入片段和启动子有一定空间间隔以确保转录的发生。
● ShRNA目的序列的第一个碱基必须是G以确保RNA聚合酶转录。如果选择的目的序列不以G开头，必须在紧连正义链的上游加一个G。
● ShRNA插入片段中的茎环应当靠近寡核苷酸的中央。不同大小和核苷酸序列的茎环都被成功的运用过。其中包含一个独特的限制性酶切位点的茎环利于检测带有shRNA插入片段的克隆。如上图所示的茎环序列就包含一个HindIII酶切位点。5'TTCG3'通常作为茎环序列。而在比较了众多不同长度和序列的茎环，5'TCAAGAG3'序列最为有效。
● 5-6个T必须放置在shRNA插入片段尾部以确保RNA聚合酶III终止转录。
● 在正义链和反义链序列上不能出现连续3个或以上的T。这可能导致shRNA转录的提前终止。

If the upper strand of the target sequence does not begin with a G nucleotide, a G must be included immediately upstream of the target sequence.
Figure 3 shRNA insert design.

产品信息：
GeneEraser shRNA expression vector 货号：240090
包括: pGE-1 shRNA expression vector
pGE-1-neg control vector
SCS-1 host strain
GeneEraser shRNA expression control 货号：240093
包括: pGE-1-shluc control vector
pGE-1-neg control vector
pCMV-luc control vector

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