Q & A

核酸纯化试剂常用问题解答

Perfectprep 胶回收试剂盒每根回收柱能回收的胶的最大重量是多少？
   每根柱回收的胶重量不要超过400 mg。如果胶的重量太大，建议切开用两根柱来回收。

Perfectprep 胶回收试剂盒每根回收柱的膜最大结合量是多少？
   最多10 mg。

Perfectprep 胶回收试剂能回收的片段范围是多大？
   70 bp –10 kb。

使用FastPlasmid Mini 试剂盒时，能否反复吹打沉淀，缩短在漩涡振荡器上振荡的时间？
   不能。在漩涡振荡器上振荡30秒对细胞重悬和裂解十分重要，如果这一步没有完成好，将大大降低最终得率。

FastPlasmid中的裂解缓冲液在使用前是否必须4°C预冷？
   是的。使用前将裂解缓冲液的温度降到4°C对质粒DNA的得率和纯度十分关键。如果未达到这一标准，将降低质粒DNA的

   纯度以及得率。

使用FastPlasmid Mini 试剂盒抽提获得的质粒DNA为什么有时一经限制性酶切就会降解？
   某些菌株（如HB101和JM101）是end A＋阳性菌株。需要在常规洗涤前先用3M 盐酸胍/50%异丙醇洗涤液洗涤，即可灭  

   活endonuclease活性。

使用FastPlasmid Mini 试剂盒时，怎样才能提供低拷贝质粒的产量？
   多数情况下，在裂解液上柱前加入125 ml 异丙醇将提高产量。

使用FastPlasmid Mini 试剂盒时，能否用分子生物学级的水代替洗脱液洗脱质粒DNA？
   可以。但是如果想获得最佳产量以及使DNA溶液更稳定，建议使用FastPlasmid 试剂盒自带的洗脱液。

使用FastPlasmid Mini 试剂盒时，建议使用的细菌培养物体积是多少？
   最多可使用3 ml 细菌培养物。强烈建议使用LB培养基。不建议使用富营养培养基，如2×YT。

装有Phase Lock Gel的试管在使用前能高压灭菌吗？
   不能。经高压灭菌后，胶将无法保持原有性状。因为胶的生产和灌装过程都是严格无菌的，所以使用前无需高压灭菌。

酚/氯仿加入装有Phase Lock Gel的试管后能否放置一段时间后再操作？
   可以。即使放置3-4小时也不会有任何问题。要注意的是 装有Phase Lock Gel 的试管在使用前必须先离心，使胶集中在管的底部。