综述：重编程自然杀伤细胞用于下一代癌症疗法

本期《Cancer Cell》刊登两项突破性研究，Biederst?dt与Nikolic团队运用全基因组CRISPR筛选技术，揭示了自然杀伤（NK）细胞功能的新型调控因子，为开发下一代NK细胞免疫疗法提供了关键靶点与理论支撑。

　　

自然杀伤细胞的治疗潜力与挑战

自然杀伤细胞（NK细胞）作为先天免疫系统的核心效应细胞，具有识别并清除恶性细胞的独特能力，无需主要组织相容性复合体（MHC）限制。然而，其在癌症免疫治疗中的应用仍面临持久性不足、肿瘤微环境（TME）抑制以及靶向特异性有限等挑战。

CRISPR筛选技术突破

Biederst?dt团队与Nikolic团队通过全基因组CRISPR-Cas9功能缺失筛选，系统鉴定了调控NK细胞细胞毒性的关键基因网络。研究发现，线粒体功能相关基因（如ATP合成酶亚基）的缺失显著增强NK细胞介导的肿瘤细胞裂解能力，提示代谢重编程可提升效应功能。

新型调控因子的发现

筛选结果揭示了多个先前未表征的调控因子，包括抑制性受体信号通路组件（如CD96-TIGIT轴）和细胞因子信号传导模块（如IL-15-JAK/STAT通路）。其中，转录因子ZBED3被确定为NK细胞脱颗粒作用的核心负调控因子，其敲除可使干扰素-γ（IFN-γ）分泌量提升3倍。

靶向策略的开发

研究进一步通过体内外实验验证了CRISPR筛选结果。利用腺相关病毒（AAV）载体对人类原代NK细胞进行基因编辑，沉默ZBED3基因后，NK细胞对卵巢癌PDX模型的杀伤效率提高40%，且未引发细胞因子风暴等不良反应。

临床转化前景

该研究为下一代NK细胞疗法提供了三大方向：一是通过基因编辑技术（如CRISPR-Cas9）构建代谢增强型NK细胞；二是开发针对新型调控因子的小分子抑制剂；三是设计联合免疫检查点阻断（ICB）的序贯治疗方案。目前基于该发现的首个临床试验（NCT05258890）已进入Ⅰ期阶段。

技术创新的意义

全基因组CRISPR筛选在NK细胞研究领域的应用，突破了传统基因功能研究的技术瓶颈。该研究首次构建了NK细胞功能调控的全局遗传网络图谱，为系统免疫学提供了范式转移。同时建立的离体高通量功能验证平台，可加速肿瘤免疫治疗靶点的发现流程。

未来挑战与方向

尽管取得突破性进展，NK细胞疗法仍面临体内持久性、肿瘤归巢效率以及规模化制备等问题。下一代研究需聚焦于：①开发体内直接编辑NK细胞的靶向递送系统；②解析TME中免疫抑制信号的动态变化机制；③建立标准化异体NK细胞扩增工艺。