综述：DNA纳米技术介导的细胞外囊泡生物分析

本综述系统阐释了DNA纳米技术（利用其可编程性、高特异性和信号放大能力）在细胞外囊泡（EVs）生物分析中的突破性应用，涵盖适配体识别、无酶催化扩增电路（如HCR、CHA）、酶催化技术（如RCA、CRISPR-Cas系统）及DNA纳米结构辅助放大等核心策略，为疾病诊断液态活检提供了前沿技术视角。

　　

适配体识别技术

DNA纳米技术通过设计特异性适配体（aptamer）实现对EV表面蛋白的高灵敏度识别。此类核酸探针可精准结合肿瘤衍生EVs的特定膜蛋白（如CD63、EpCAM），为癌症早期诊断提供分子基础。

无酶催化放大策略

通过杂交链反应（HCR）和催化发夹组装（CHA）等无酶扩增技术，显著提升低丰度核酸标志物（如miRNA-21、mRNA突变体）的检测信噪比。这类等温扩增方法避免了传统PCR的热循环需求，适用于即时检测场景。

酶辅助信号放大

滚环扩增（RCA）与CRISPR-Cas系统协同工作，可实现单分子级别核酸检测。Cas12a/cas13a在激活后非特异性切割报告分子，产生级联荧光信号，尤其适用于EV内肿瘤相关RNA标志物的超灵敏量化分析。

DNA纳米结构辅助检测

三维DNA纳米框架（如四面体结构）通过精确控制探针空间取向，增强表面识别效率。该类结构可整合多价适配体阵列，同步检测EVs的蛋白与核酸多重靶点，提升多参数诊断可靠性。

多平台集成与临床挑战

当前技术已实现微流控芯片与电化学传感的平台整合，支持高通量EV分离分析。然而，临床转化仍面临标准化、批次重复性及复杂生物基质干扰等挑战，未来需开发标准化参考材料与自动化检测流程。