基于级联信号放大与双信号读出的肠炎沙门氏菌高灵敏检测平台开发及应用

本文开发了一种集成变构DNA探针（AP）、酶辅助信号放大与CRISPR/Cas12a系统的双模式检测平台，实现了对肠炎沙门氏菌（S. Enteritidis）的高灵敏（LOD低至1.17 CFU/mL）、高特异性检测，兼具荧光光谱与妊娠试纸（PTS）双信号输出能力，为食品安全现场快速检测提供了创新解决方案。

　　

方法

使用的试剂与仪器详见支持信息。

检测原理

本研究开发了一种集成识别、信号放大与信号输出功能的肠炎沙门氏菌多功能检测系统（图1）。设计的DNA检测探针包含三个关键区域：用于识别肠炎沙门氏菌的适体域（黄色标注）、启动扩增过程的引物杂交域（蓝色标注）以及Nt.BbvCI切割酶识别域（红色标注）。

结论

本研究开发了一种利用多功能DNA探针与CRISPR/Cas12a系统的双平台检测系统，用于肠炎沙门氏菌的高灵敏度实时检测。该方法将基于适体的细菌识别与DNA切割聚合循环扩增有效结合，显著提升了检测灵敏度与特异性。Cas12a介导的反式切割作用放大了检测信号，确保了复杂样本中目标病原体的精准识别。

未引用参考文献

[9], [10], [11]

作者贡献声明

孙玉军： 方法论，研究实施。葛春萍： 验证，资源。李梦梦： 研究实施，形式分析。张玉琪： 项目管理，方法论。刘子玉： 验证，方法论。董佳伟： 可视化，研究实施。宋新月： 初稿撰写，监督，资金获取，概念化。张树生： 审稿编辑，监督，资金获取，概念化。张艳： 形式分析，数据整理。史新丽： [未具体说明]

利益冲突声明

作者声明不存在任何已知的竞争性经济利益或个人关系影响本研究结果。

致谢

本研究由国家自然科学基金（编号：2217608、22274068）、山东省泰山学者青年专家计划（tsqn202312253）、山东省高等学校青年创新团队计划（2022KJ117）及临沂市重点研发计划（2023026）资助。

补充材料

支持信息包括仪器、材料与试剂、所设计AP的选择性评估、检测方法的特异性评估及回收率评估等。