新型苯基硫代磷酸二氯骨架H2S供体3b-1的多功能活性评价：抗炎、心脏保护与肝脏保护作用研究

本文系统评价了基于苯基硫代磷酸二氯骨架设计的新型H2S供体3b-1的多重生物活性。研究证实该化合物通过高效释放H2S（硫化氢），显著抑制TNF-α（86%）、TNF-β（82%）等炎症因子，并在H2O2诱导的肝细胞损伤模型中降低MDA（79%）、提升SOD（49%）和GSH（76%），同时抑制HSC（肝星状细胞）活化（55%）。在LPS（脂多糖）诱导的心肌损伤模型中，3b-1能稳定线粒体膜电位，降低LDH（34%）和CK-MB（24%），展现协同抗氧化与器官保护作用，为炎症和氧化应激相关疾病治疗提供新策略。

　　

1 引言

作为继NO（一氧化氮）和CO（一氧化碳）之后第三类气体信号分子，H₂S（硫化氢）在心血管稳态调节、炎症抑制和肝细胞代谢中发挥关键作用。然而传统供体如NaHS存在半衰期短、释放不可控等缺陷。本研究基于苯基硫代磷酸二氯骨架，开发了可响应微环境触发的新型H₂S供体，旨在解决现有疗法的瓶颈问题。

2 结果与讨论

2.1 化学合成

通过三氯化铝催化苯与PCl₃的傅-克反应，经硫粉修饰获得关键中间体苯基硫代磷酸二氯（化合物2），再与乙醇胺等亲核试剂通过SN₂机制合成9种衍生物。核磁数据显示，3b系列苯环电子密度增加导致化学位移上移0.5 ppm，证实其更易释放H₂S。

2.2 化合物毒性

MTT实验显示，所有化合物在200 μM浓度下对LO2肝细胞和WI38肺成纤维细胞的存活率>95%，显著优于阳性对照5-Fu（5-氟尿嘧啶），安全性优异。

2.3 H₂S释放特性

3b-1在pH 7.4的PBS中5小时内释放达平台期，累积释放量最高。其磷-硫骨架的电子给体效应促进水解，而3c系列因氯取代基的吸电子作用抑制释放。甲基蓝法检测揭示其释放动力学符合缓释需求。

2.4 抗炎活性

在LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞模型中，3b-1通过抑制NF-κB通路，使TNF-α和TNF-β分别降低86%和82%，同时减少67%的亚硝酸盐积累，且无细胞毒性。

2.5 肝脏保护作用

700 μM H₂O₂诱导的BRL-3A肝细胞损伤模型中，3b-1剂量依赖性恢复细胞活力，将MDA从氧化应激峰值降低79%，并提升SOD和GSH活性。此外，它通过抑制TGF-β1信号使HSC-T6细胞活化率下降55%，展现抗纤维化潜力。

2.6 心脏保护机制

在5 μg/mL LPS诱导的H9c2心肌细胞脓毒症模型中，3b-1通过维持线粒体膜电位，使LDH和CK-MB释放量显著降低，同时逆转GSH耗竭（恢复73%）和MDA积累（降低48%），证实其通过AMPK/mTOR通路减轻自噬损伤。

3 结论

苯基硫代磷酸酯骨架衍生物3b-1集高效H₂S缓释、多靶点抗炎（TNF-α/β）、双重器官保护（肝/心）于一体，其协同调控氧化还原平衡（GSH/MDA/SOD）和纤维化进程的特性，为肝损伤、脓毒症心肌病等疾病提供了突破性治疗策略。

4 实验方法

合成采用硅胶柱层析纯化，结构经¹H/¹³C NMR和HRMS确认。细胞实验采用CCK-8法测活力，ELISA检测细胞因子，JC-1探针评估线粒体膜电位。数据经SPSS 22.0单因素方差分析，结果以均值±标准差表示。