病原结合C型凝集素和纤维胶凝蛋白通过Sp?tzle1剪切增强斑节对虾对白斑综合征病毒（WSSV）的Toll受体信号通路激活机制

这篇研究揭示了斑节对虾（Penaeus monodon）在应对白斑综合征病毒（WSSV）感染时，其先天免疫系统中C型凝集素（C-type lectin）和纤维胶凝蛋白（ficolin）通过结合病原体并促进Sp?tzle1剪切，进而激活Toll受体信号通路（MyD88/TRAF6/NF-κB）的关键机制。研究结合基因表达谱、重组蛋白互作验证及计算结构分析（HADDOCK/PDBePISA），为甲壳类抗病毒免疫提供了新靶点，对水产养殖病害防控具有重要应用价值。

　　

Highlight

本研究通过实验验证了斑节对虾免疫级联反应的核心机制，包括病原结合实验、Sp?tzle1剪切分析、Toll受体互作以及WSSV感染后免疫基因（如MyD88和TRAF6）的表达谱检测。

Section snippets

动物与病毒

健康斑节对虾幼体（15-20克）取自印度本地养殖场，在恒温海水（盐度25 ppt，pH 7.8-8.2）中驯化7天。实验采用白斑综合征病毒（WSSV）毒株IN-HKR-MB-ASA-II，该毒株通过克氏原螯虾（Procambarus clarkii）血淋巴扩增。

实验感染

独立重复实验分为两组：对照组注射PBS缓冲液，感染组注射WSSV悬液（10⁵拷贝/μL）。分别在0、6、12、24、48和72小时采集血淋巴细胞，用于基因表达和蛋白互作分析。

基因表达分析

qPCR扩增曲线显示，WSSV感染组中C型凝集素（98%扩增效率）、纤维胶凝蛋白（102%）、Sp?tzle1（95%）和部分Toll受体（97%）的表达显著上调。ΔΔCt分析表明，C型凝集素和纤维胶凝蛋白分别诱导4.2倍和3.8倍表达，提示其在病毒识别中的关键作用。

Toll通路组分与凝集素家族基因

C型凝集素对WSSV糖蛋白的识别能力与现有文献一致，而纤维胶凝蛋白的3.8倍上调表明其可能通过Sp?tzle1剪切协同激活Toll通路。

结论

病原结合的凝集素和纤维胶凝蛋白通过促进Sp?tzle1剪切，显著增强Toll受体信号通路的激活，为甲壳类抗病毒免疫机制提供了新见解。