长链非编码RNA SNHG12通过靶向E3连接酶TRIM25调控KEAP1稳定性与铁死亡敏感性的分子机制研究

本研究揭示了长链非编码RNA SNHG12通过竞争性结合E3泛素连接酶TRIM25，调控KEAP1-NRF2抗氧化通路的新机制。研究人员发现SNHG12在铁死亡（ferroptosis）诱导下被P53转录激活，通过干扰TRIM25介导的KEAP1泛素化降解，增强NRF2抑制，从而提升细胞内活性铁（labile iron）水平并加速谷胱甘肽（GSH）耗竭，最终促进肿瘤细胞铁死亡敏感性。该发现为基于铁死亡的癌症治疗提供了新靶点。

　　

细胞死亡形式中，铁死亡（ferroptosis）作为一种铁依赖性脂质过氧化驱动的程序性死亡方式，近年来成为肿瘤治疗的新突破口。然而，肿瘤细胞如何动态调控铁死亡敏感性仍是未解之谜。长链非编码RNA（lncRNA）作为基因表达的"暗物质"，在细胞命运决定中扮演关键角色，但其在铁死亡中的调控网络尚不清晰。

华中农业大学动物医学院的Yubo Guo等人在《Journal of Biological Chemistry》发表的研究，首次揭示了小核仁RNA宿主基因12（SNHG12）通过E3连接酶TRIM25-KEAP1-NRF2轴调控铁死亡的新机制。研究人员发现，铁死亡诱导剂Erastin和RSL3通过激活P53显著上调SNHG12表达。在分子机制上，SNHG12像"分子诱饵"般竞争性结合TRIM25的卷曲螺旋（CC）和PRY/SPRY结构域，阻断TRIM25对KEAP1的泛素化修饰，从而稳定KEAP1蛋白。这种相互作用导致转录因子NRF2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2）持续降解，抑制其下游靶基因FTH（铁蛋白重链）和SLC7A11（胱氨酸/谷氨酸转运体）的表达，最终提高细胞内活性铁池（labile iron pool）并加速GSH耗竭，使肿瘤细胞对铁死亡敏感。

研究采用的关键技术包括：染色质免疫沉淀（ChIP）验证P53对SNHG12启动子的结合；RNA免疫共沉淀（RIP）和RNA pull-down鉴定SNHG12-TRIM25互作；泛素化实验检测KEAP1修饰状态；铁探针PGSK和脂质过氧化探针C11 BODIPY 581/591动态监测铁死亡特征；TCGA数据库分析SNHG12的临床相关性。

SNHG12在铁死亡诱导下被P53转录激活

通过启动子荧光素酶报告系统和ChIP-qPCR证实，铁死亡诱导剂通过P53结合SNHG12启动子区（-306～-291 bp和-116～-101 bp）激活其转录。P53抑制剂PFT-α或siRNA敲低均可阻断这种诱导效应。

SNHG12双向调控铁死亡敏感性

功能实验显示：SNHG12敲低显著抑制Erastin/RSL3诱导的细胞死亡、脂质过氧化和活性铁积累，并延缓GSH耗竭；而过表达则产生相反效果。克隆形成实验进一步证实SNHG12决定肿瘤细胞对铁死亡的长期敏感性。

SNHG12-TRIM25互作决定KEAP1稳定性

RNA pull-down和RIP实验锁定SNHG12的S2片段（588-881 nt）与TRIM25的CC/PRY/SPRY域特异性结合。这种结合像"分子开关"般削弱TRIM25-KEAP1相互作用，使KEAP1逃脱泛素化降解（MG132处理可逆转此效应），导致NRF2核转位减少，抗氧化基因表达下调。

临床转化潜力

TCGA分析显示SNHG12在23种癌症中高表达，且与ACC、KIRC等患者不良预后相关。药物敏感性预测提示SNHG12高表达肿瘤对阿法替尼等促铁死亡药物更敏感，为精准治疗提供分子标志物。

这项研究首次描绘了"P53-SNHG12-TRIM25-KEAP1-NRF2"调控轴，阐明了lncRNA通过蛋白质稳态调控铁死亡的新范式。不仅为理解非编码RNA在细胞死亡中的功能提供新视角，更提示靶向SNHG12可能增强肿瘤对铁死亡诱导治疗的敏感性。特别是针对KEAP1突变型肿瘤（通常对常规治疗耐药），该发现提供了通过RNA-蛋白质相互作用调控NRF2活性的新策略。未来研究可进一步探索SNHG12在个体化癌症治疗中的应用潜力，以及其编码的snoRNA是否参与铁死亡调控。