靶向微孢子虫跨膜蛋白NbTMP1培育抗微粒子病家蚕新品种的研究

【编辑推荐】本研究通过构建表达NSlmb::scFvF12单链抗体的转基因家蚕品系N-F12，利用宿主泛素-蛋白酶体系统（UPS）特异性降解病原体关键蛋白NbTMP1，首次实现家蚕对微粒子病（Pébrine）的显著抗性，为无脊椎动物病原防御提供了新范式。

　　

Highlight

实验昆虫、微孢子虫及细胞系

家蚕（品种305）幼虫由中国西南大学家蚕基因组学国家重点实验室提供。实验采用中国兽医微生物菌种保藏中心的微孢子虫（Nosema bombycis）CQ1分离株（保藏号CVCC 102059），通过四龄幼虫饲喂孢子侵染法扩增病原体，并在蛹期研磨感染组织获取高纯度孢子。

单克隆抗体(mAb)与scFv序列改造

基于前期获得的靶向NbTMP1的IgG1-κ型单抗F₁₂（郑等，2021），本研究通过重叠PCR技术将轻链可变区（V_L）与重链可变区（V_H）融合为单链抗体(scFvF₁₂)，并连接NSlmb（含Slmb蛋白F-box结构域）构建成"分子诱饵"NSlmb::scFvF₁₂，可引导宿主UPS系统精准降解NbTMP1。

讨论

作为人类驯化的产丝昆虫，家蚕对微孢子虫（N. bombycis）引发的微粒子病高度易感。本研究创新性地将脊椎动物适应性免疫机制（scFv抗体）与无脊椎动物蛋白降解通路（UPS）相结合，培育出经济性状稳定且具显著病原抗性的转基因品系，为蚕业可持续发展提供突破性解决方案。