鼠李糖乳杆菌GG上清液通过修复肠屏障及调控Reg3γ基因改善代谢相关脂肪肝病的作用机制

本研究揭示了鼠李糖乳杆菌GG上清液（LGGs）通过TLR2/MyD88/pSTAT3信号通路上调再生基因3γ（Reg IIIγ）表达，修复高脂饮食（HFD）诱导的肠屏障损伤，从而改善代谢相关脂肪肝病（MAFLD）的分子机制。实验证实LGGs可显著降低血清LPS水平、调节肠道菌群（如增加拟杆菌门/厚壁菌门比值），并通过促进紧密连接蛋白（ZO-1/occludin）表达缓解肠漏，为益生菌代谢物治疗MAFLD提供新靶点。

　　

1 引言

代谢相关脂肪肝病（MAFLD）全球患病率达25%，其发病与肠道菌群紊乱和肠屏障损伤密切相关。高脂饮食（HFD）会抑制抗菌肽再生基因3γ（Reg IIIγ）表达，该蛋白通过调控TLR2/MyD88/pSTAT3通路维持肠道稳态。鼠李糖乳杆菌GG（LGG）的代谢产物显示出调节Reg IIIγ的潜力，但其在MAFLD中的具体机制尚未阐明。

2 材料与方法

研究采用HFD喂养C57BL/6J小鼠建立MAFLD模型，分为标准饮食+PBS、标准饮食+LGGs、HFD+PBS、HFD+LGGs四组。通过qPCR和Western blot检测Reg IIIγ表达，16S rDNA测序分析菌群，FITC-葡聚糖评估肠通透性。体外实验使用Caco-2和IEC-6细胞系，通过siRNA敲除MyD88验证通路机制。

3 结果

3.1 LGGs改善MAFLD表型

HFD组小鼠出现典型肝脂肪变性（油红O染色显示脂滴沉积），而LGGs干预组肝重降低21%，血清ALT、AST、TG分别下降34%、28%、41%（p<0.01）。肝脂代谢基因Srebf1、Fasn表达显著下调。

3.2 调节肠道菌群平衡

HFD导致拟杆菌门（Bacteroidetes）丰度降低40%，厚壁菌门（Firmicutes）增加2.3倍。LGGs干预后，产短链脂肪酸的Oscillospira菌属回升1.8倍，α多样性指数（Shannon）提升27%。

3.3 修复肠屏障功能

HFD组小鼠回肠绒毛结构紊乱，ZO-1蛋白表达降低62%。LGGs治疗使Reg IIIγ mRNA水平升高3.1倍，血清LPS和FITC-葡聚糖分别减少53%和48%（p<0.001）。

3.4 机制验证

体外实验显示，10% LGGs刺激24小时使Caco-2细胞HIP/PAP（人源Reg IIIγ同源物）蛋白表达增加2.7倍。MyD88 siRNA转染或TLR2抑制剂C29预处理可完全阻断此效应，证实TLR2/MyD88/pSTAT3通路的必要性。

4 讨论

LGGs通过分泌的活性成分（非活菌）激活肠上皮细胞TLR2，触发MyD88依赖的STAT3磷酸化，进而上调Reg IIIγ表达。该蛋白通过双重机制发挥作用：①直接杀菌减少病原体易位；②促进紧密连接蛋白组装。值得注意的是，Reg IIIγ表达与血清LPS水平呈强负相关（r=-0.82），提示其可作为MAFLD无创诊断标志物。

5 结论

本研究首次阐明LGGs通过肠-肝轴调控Reg IIIγ改善MAFLD的完整机制，为开发基于益生菌代谢物的无活菌疗法提供理论依据。未来需分离鉴定LGGs中的关键活性分子，并探索其在人类HIP/PAP调控中的转化应用价值。