南美浣熊(Nasua nasua)精子冷冻保存及生精上皮细胞学特征研究：基于犬科动物冷冻方案的跨物种应用探索

本研究首次系统描述了南美浣熊睾丸细针穿刺细胞学(FNAC)特征，采用电刺激采精法结合犬科动物冷冻方案（省略离心步骤）成功实现精子冷冻保存。研究发现：生精上皮细胞系中次级精母细胞缺失；解冻后精子活力达30.0±17.32%（46°C/15s解冻组）；阴茎骨和包皮腺发育特征为食肉动物典型结构。该研究为Procyonidae科野生动物辅助生殖技术提供了重要模板。

　　

Highlight

本研究首次揭示了南美浣熊睾丸生精上皮的细胞学特征，创新性地将犬科动物精子冷冻方案应用于该物种，为野生动物生殖保护提供了重要技术参考。

伦理声明

实验遵循机构动物护理与使用委员会(IACUC)指南，所有操作均符合巴西国家动物实验控制委员会(CONCEA)规范。研究对象为种群控制需绝育的个体，在标准麻醉程序下先行采集精液样本及睾丸细胞学检测，后实施输精管切除术。

结果

仅1份FNAC样本符合检测标准（其余因血液污染被排除）。镜下可见：嗜碱性胞质的精原细胞（染色质致密规则）；初级精母细胞（胞质稀少、核不规则）；未发现次级精母细胞；圆形精子细胞呈簇状分布，核染色质疏松；成熟精子头部呈独特角形结构。睾丸平均体积4.5 cm³（2.13×1.7×1.7 cm）。46°C/15s解冻组精子活力(30.0±17.32%)显著优于37°C/30s组(23.33±11.55%)。

讨论

这是首个系统描述南美浣熊睾丸细胞学的研究。次级精母细胞的缺失与其短暂存在周期相关，该现象在犬类研究中亦有报道。值得注意的是，本研究突破性地采用犬科动物冷冻方案（保留精浆）成功实现精子保存，解冻后活力维持20-70%。阴茎骨发育特征印证了食肉动物的共性进化特征。研究为Procyonidae科物种的精子库建立提供了关键技术参数。

结论

睾丸FNAC可作为评估生精功能的可靠手段。电刺激采精结合改良犬科冷冻方案（无需精浆去除）在南美浣熊精子保存中具有可行性，该成果为其他近缘物种的生殖保护提供了重要技术范式。