人支气管细胞中芳胺N-乙酰转移酶1（NAT1）基因敲除导致细胞生长抑制的机制研究

本研究通过CRISPR/Cas9技术构建NAT1基因敲除（KO）的永生化人支气管上皮细胞（BEP2D）和肺成纤维细胞（WTHBF-6），首次揭示NAT1在非肿瘤性肺细胞中的非经典功能：其缺失导致细胞生长减缓、集落密度降低，但未诱发基因组不稳定性。该发现为NAT1在能量代谢（如TCA循环）和线粒体功能（如PDH活性）中的新角色提供了直接证据，提示其可能成为肺癌治疗的潜在靶点。

　　

亮点

CRISPR/Cas9构建的NAT1敲除人肺细胞模型显示对氨基苯甲酸（PABA）乙酰化功能丧失

我们通过CRISPR/Cas9技术在两种人肺细胞系（BEP2D和WTHBF-6）中插入两种不同的gRNA序列，经克隆扩增后筛选获得NAT1敲除细胞株。通过检测NAT1特异性底物对氨基苯甲酸（PABA）的N-乙酰化水平（这可是NAT1活性的黄金标准哦！），证实这些细胞确实失去了NAT1的酶活功能。基因测序更是在DNA水平实锤了NAT1基因的编辑成功。

讨论

敲除NAT1后，非肿瘤性人肺细胞竟然开始"躺平"了——生长速度明显放缓，集落形态也变得"稀疏松散"。更有趣的是，虽然细胞变懒了，但它们的染色体却稳如泰山，核型分析显示基因组稳定性未受影响。这些发现强烈暗示：NAT1可能像细胞代谢的"隐形开关"，通过调控线粒体功能（比如影响PDH活性和细胞色素C释放）来指挥细胞的"生长节奏"。

结论

这项研究首次在非肿瘤细胞中证实：NAT1不仅是传统的解毒酶，更是细胞生长的"代谢指挥官"。我们构建的细胞模型为后续解密NAT1如何"远程操控"线粒体代谢网络（特别是葡萄糖-TCA循环通量）提供了绝佳工具。下步研究将聚焦NAT1与能量代谢"发电站"（线粒体）之间的神秘对话机制。