LncRNA MALAT1通过miR-383-5p/PRKAG1轴调控肝细胞癌进展的分子机制及其在肿瘤免疫微环境中的作用

本研究揭示了长链非编码RNA（lncRNA）MALAT1通过ceRNA机制吸附miR-383-5p上调PRKAG1表达，激活P53/AKT信号通路并重塑肿瘤免疫微环境（TIME），促进肝细胞癌（HCC）恶性进展。多组学分析证实PRKAG1通过MIF-(CD74+CXCR4)网络增强免疫细胞互作，为HCC靶向治疗提供新策略。

　　

引言

肝细胞癌（HCC）作为全球高发恶性肿瘤，其发生发展与长链非编码RNA（lncRNA）的异常表达密切相关。转移相关肺腺癌转录本1（MALAT1）作为明星分子，在多种癌症中呈现显著高表达，但其在HCC中的下游调控网络尚未完全阐明。本研究通过多组学方法系统解析了MALAT1/miR-383-5p/PRKAG1轴在HCC中的分子机制，首次揭示AMPKγ1亚基PRKAG1通过代谢-免疫交叉调控驱动肿瘤进展的新功能。

研究方法

研究整合TCGA、GEPIA2等数据库进行生物信息学分析，结合体外细胞实验（MHCC97H/Huh-7细胞系）和体内小鼠原位移植瘤模型。采用CIBERSORT算法评估免疫浸润，单细胞RNA测序（scRNA-seq）解析细胞互作网络，Western blot验证P53/p-AKT蛋白表达。通过RNAhybrid预测miR-383-5p与PRKAG1 3'-UTR的结合位点，并构建shRNA敲低模型验证功能。

核心发现

MALAT1的致癌特性：

TCGA数据显示HCC组织中MALAT1表达较正常组织升高4.3倍（P<0.0001），且高表达组患者无病生存期（DFS）显著缩短（HR=2.1）。体外实验证实，敲低MALAT1使HCC细胞增殖率下降62%（CCK-8法），迁移和侵袭能力分别降低55%和48%（Transwell实验）。

PRKAG1的临床意义：

PRKAG1在33种癌症中普遍高表达，HCC患者高表达组5年总生存率仅28.6%（低表达组为59.3%）。多因素Cox回归显示PRKAG1是独立预后因子（HR=1.052，95%CI:1.010-1.096）。单细胞分析揭示其在肿瘤组织中特异性富集于肝细胞（P<0.01）和单核细胞（P<0.05）。

ceRNA调控轴验证：

MALAT1通过3个结合位点（227/344/891）竞争性吸附miR-383-5p，解除其对PRKAG1的抑制。当同时敲低MALAT1并抑制miR-383-5p时，PRKAG1蛋白表达可恢复至对照组的82%。

免疫微环境重塑：

PRKAG1⁺髓系细胞通过MIF-(CD74⁺CXCR4)网络增强细胞间通讯强度3-5倍（CellChat分析）。高表达组M0巨噬细胞浸润增加2.1倍（P<0.01），而记忆B细胞减少37%（P<0.05）。

信号通路激活：

PRKAG1通过上调p-AKT（Ser473磷酸化水平增加1.8倍）和p53促进细胞周期进程。KEGG富集显示其关联基因显著参与G2/M检查点调控（P=5.90×10^-29）。

讨论与展望

该研究突破性地将lncRNA调控、代谢重编程与免疫微环境三大领域串联：MALAT1通过"分子海绵"作用解除miR-383-5p对PRKAG1的抑制；PRKAG1则发挥"代谢-免疫转换器"功能，既调控P53/AKT经典通路，又通过MIF信号网络重塑免疫抑制微环境。未来研究可聚焦PRKAG1抑制剂与PD-1抗体的联用策略，为HCC的"表观遗传-代谢-免疫"三位一体治疗提供新思路。