电纺PLA-明胶复合支架搭载3D来源细胞外囊泡促进大鼠鼓膜穿孔修复的研究

本研究创新性地将电纺聚乳酸（PLA）-明胶复合支架与脂肪干细胞（ADSCs）来源的3D细胞外囊泡（EVs）结合，通过体外实验证实EVs可促进鼓膜成纤维细胞增殖迁移及修复相关基因表达，体内实验显示该支架显著加速大鼠鼓膜穿孔修复，胶原分泌量优于对照组（P<0.05），为鼓膜损伤提供了无细胞治疗新策略。

　　

Highlight

材料

(1) 实验动物：使用8周龄SD大鼠（SCXK豫2021-0002），体重(231.40±5.17)g，建立鼓膜穿孔模型。

(2) 实验材料：聚乳酸（PLA，广州迈普）、明胶（上海麦克林）、脂肪干细胞（ADSCs）、PKH26标记试剂盒（Sigma）、α-SMA抗体（abcam）等。

ADSCs来源外泌体表征

透射电镜（TEM）显示EVs呈典型圆形/椭圆形膜结构，粒径分析证实其为通过同轴打印技术制备的ADSCs-EVs，具有生物活性分子递送能力。

讨论

传统鼓膜修复手术存在二次创伤、瘢痕形成等缺陷。本研究首创的PLA-明胶电纺膜（厚度0.15?mm）模拟鼓膜纤维层结构，搭载3D-EVs后形成仿生微环境，显著促进胶原分泌（P<0.05）和细胞迁移。该技术突破干细胞治疗伦理限制，通过EVs的旁分泌作用实现无细胞修复。

结论

PLA-明胶支架联合3D-EVs通过双重机制修复鼓膜：①力学支撑：支架机械强度匹配天然鼓膜；②生物调控：EVs激活成纤维细胞分泌胶原（Col1a1↑3.2倍），为鼓膜再生医学提供转化潜力。