减毒株RVFV-40Fp8疫苗在妊娠母羊中的安全性及抗强毒株攻击保护效力研究

为解决裂谷热病毒(RVFV)活疫苗在妊娠期应用的安全性问题，研究人员通过系列动物实验评估了减毒株40Fp8在非妊娠和妊娠母羊中的免疫原性、安全性及保护效力。结果表明，40Fp8接种后未引起胎儿损伤，且能有效抵抗强毒株56/74攻击，为开发安全有效的RVF减毒活疫苗提供了重要依据。该成果发表于《npj Vaccines》。

　　

裂谷热(Rift Valley fever, RVF)是一种由裂谷热病毒(RVFV)引起的人畜共患病，在家畜中可导致高达100%的流产率，给非洲及阿拉伯半岛地区的畜牧业造成巨大经济损失。当前使用的减毒活疫苗如Smithburn株和MP12株虽在成年动物中安全有效，但其在妊娠动物中的应用仍存在安全隐患。因此，开发一种对妊娠动物和胎儿均安全的RVF疫苗成为迫切需求。

在这项发表于《npj Vaccines》的研究中，Belen Borrego等研究者对前期通过法匹拉韦(Favipiravir)诱变获得的超减毒株RVFV-40Fp8进行了系统评估。该毒株含有NSs蛋白的P82L突变及L蛋白的G924S和A1303T突变，此前已在免疫缺陷小鼠模型中显示出卓越的安全性。研究团队通过四个系列实验，全面考察了该疫苗候选株在自然宿主(绵羊)中的表现。

关键技术方法包括：(1)使用不同接种途径(皮下和静脉)评估免疫原性；(2)建立妊娠母羊感染模型(妊娠45-56天)进行安全性评价；(3)采用强毒株56/74进行攻毒保护实验；(4)综合运用病毒分离、RT-qPCR、血清学检测(中和抗体和竞争ELISA)及组织病理学分析等技术手段。实验动物包括非妊娠Churra母羊、妊娠Manchegan母羊和Castilian母羊。

在免疫原性研究部分，高剂量(10⁷ pfu)接种40Fp8的母羊未出现发热、病毒血症或肝损伤等不良反应，与强毒株56/74接种组形成鲜明对比。通过不同接种途径比较发现，无论是皮下还是静脉接种，40Fp8均能诱导产生中和抗体(nAbs)和细胞免疫应答(IFN-γ分泌)，且抗体水平在7-14天内达到保护阈值(>1:40)。

安全性评价结果显示，妊娠母羊接种40Fp8后，27个胎儿均发育正常，未观察到流产或胎儿畸形。尽管在部分母羊血液和组织样本中检测到低水平病毒RNA(Cq>35)，但病毒分离始终为阴性，免疫组化也未检出病毒抗原，证实了疫苗株在妊娠期的安全性。

在关键的攻毒保护实验中，疫苗接种组母羊和胎儿均未出现临床症状或病理损伤，而非免疫对照组则表现出典型RVF症状：肝坏死、胎盘感染及胎儿死亡。值得注意的是，尽管在部分免疫母羊的脐血样本中检测到病毒RNA，但病毒分离均为阴性，表明母源抗体有效阻断了病毒传播。组织学分析显示，对照组胎儿的脑、肝、肾等器官存在病毒抗原，而免疫组胎儿各组织均未检出。

讨论部分指出，40Fp8株的三重突变(P82L、G924S、A1303T)使其具有独特的减毒特性：即使在高度敏感的妊娠模型中，其复制能力也极为有限，但又能诱导足够的免疫应答。与现有RVF疫苗相比，40Fp8在安全性方面表现突出，特别是对胎儿无不良影响这一特点，使其成为理想的候选疫苗。不过研究者也指出，还需进一步评估免疫保护的持久性、加强接种效果以及在流行区的实际应用表现。

这项研究首次系统证实了40Fp8疫苗株在妊娠动物模型中的安全性和有效性，为RVF防控提供了新的疫苗选择。其创新性在于：(1)建立了严格的妊娠动物安全评价体系；(2)阐明了三重突变的减毒机制；(3)证明了单剂接种即可产生全面保护。这些发现不仅对RVF疫苗开发具有指导意义，也为其他妊娠期禁忌传染病的疫苗设计提供了重要参考。