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水稻GABA转运蛋白OsGAT3在盐旱胁迫下调控生长与产量的分子机制研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月30日 来源:The Crop Journal 6.0
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本研究针对水稻在盐碱和干旱胁迫下产量下降的突出问题,通过系统解析γ-氨基丁酸(GABA)转运蛋白基因OsGAT3的功能机制,发现其通过调控苯丙烷生物合成、MAPK信号通路和光合作用途径,显著提高水稻耐逆性并增加分蘖数(提高23.1%)和单株产量(提升18.7%)。该研究为培育抗逆高产水稻品种提供了新靶点。
在全球气候变化加剧的背景下,盐碱化和干旱已成为制约水稻生产的主要非生物胁迫因素。据统计,全球约20%的灌溉耕地遭受盐害威胁,而干旱更导致水稻减产高达50%。面对这一严峻挑战,科学家们将目光投向了植物中具有多重生理功能的γ-氨基丁酸(GABA)——这种四碳非蛋白氨基酸不仅参与碳氮平衡调控,更在植物应对环境胁迫中扮演关键角色。然而,GABA如何在水稻体内转运并协调生长与抗逆性的分子机制尚不明确,这成为制约其农业应用的瓶颈。
针对这一科学问题,来自贵州大学的Chuanbo Wang、Junnan Hang等研究团队在《The Crop Journal》发表了重要研究成果。研究人员首先利用RiceVarMap 2.0数据库对504份水稻种质进行单倍型分析,通过qRT-PCR、GUS组织定位和亚细胞定位明确OsGAT3表达特征;采用CRISPR-Cas9基因编辑和过表达技术构建转基因株系;结合FITC标记GABA摄取实验和酵母异源互补实验验证转运功能;通过盐(120 mmol/L NaCl)和干旱(15% PEG)胁迫处理,测定生理指标并进行转录组测序(RNA-seq)分析。
研究结果揭示:
OsGAT3启动子序列存在籼粳分化
在504份种质中发现OsGAT3启动子区存在16个SNP变异,形成4种单倍型。籼稻(Hap1/Hap3)表达量较粳稻(Hap2)高2.3倍,且分蘖数和氮素利用效率(NUtE)显著提升。
OsGAT3具有组织特异性表达模式
GUS染色显示该基因在根系、茎秆和叶片中高表达,低温(4°C)、盐(NaCl)和干旱(PEG)处理可诱导其表达上调3.5倍。共定位实验证实OsGAT3定位于质膜。
基因功能验证
过表达株系(OE)分蘖数增加31%,单株产量提高18.7%,而敲除株系(C)则下降22%。酵母实验证实OsGAT3可转运GABA、苯丙氨酸(Phe)等9种氨基酸。外源施加0.2 mmol/L GABA使盐胁迫存活率从35%提升至72%。
抗逆机制解析
RNA-seq发现OE株系中过氧化物酶基因OsPRx38表达上调4.2倍,MAPK通路基因激活;干旱胁迫下光合相关基因OsGLO1和OsCATC表达量增加3.8倍。代谢组分析显示OE株系叶片GABA含量提升2.1倍,H2O2和MDA含量降低40%。
田间产量验证
在30 mmol/L NaCl胁迫下,OE株系单株产量仍保持2.4g,较野生型提高26%,实现"抗逆-增产"协同调控。
这项研究首次阐明OsGAT3通过"GABA转运-代谢重编程"双途径协调水稻生长与抗逆性的分子机制。其创新性体现在:发现籼粳稻间自然变异位点,解析转运蛋白底物特异性,创制抗逆增产新材料。该成果不仅为水稻抗逆育种提供新靶点,更提出"外源GABA施用+内源基因调控"的协同增效策略,对保障粮食安全具有重要实践意义。值得注意的是,OsGAT3在不同氮水平(0.2-5 mmol/L NH4NO3)下均能促进分蘖的特性,使其在减肥增效农业中具有独特应用潜力。未来研究可进一步探索OsGAT3等位基因在分子设计育种中的价值,以及GABA信号与其他植物激素的互作网络。
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