RBM15通过m6A修饰调控TMC5促进结肠腺癌进展的机制研究

本研究针对结肠腺癌(COAD)高死亡率与预后差的临床难题，揭示了RNA结合蛋白RBM15通过m6A甲基化修饰稳定TMC5 mRNA的分子机制。研究人员通过多组学分析发现TMC5在COAD中异常高表达，实验证实其敲除可抑制细胞增殖、迁移、EMT（上皮-间质转化）和糖酵解，同时促进铁死亡(ferroptosis)和DNA损伤。创新性发现RBM15作为m6A"书写器"调控TMC5稳定性，为COAD治疗提供了新的靶点组合。

　　

结肠癌作为全球第三大高发恶性肿瘤，其腺癌亚型(COAD)因早期症状隐匿、易转移等特点，五年生存率不足15%。尽管TNM分期系统为临床决策提供了基础，但肿瘤异质性导致治疗效果差异显著。近年来，跨膜通道样蛋白家族(TMC)成员在肿瘤中的作用逐渐被揭示，其中TMC5在多种癌症中异常表达，但其在COAD中的功能机制仍是未解之谜。与此同时，表观遗传修饰尤其是m6A RNA甲基化在肿瘤发生发展中的调控作用成为研究热点，甲基转移酶RBM15在COAD中的异常表达提示其可能参与疾病进程。

为阐明上述科学问题，研究团队整合了TCGA、CPTAC等公共数据库的生物信息学分析，收集69对临床样本进行验证。实验采用Western blot、RT-qPCR等技术检测基因表达，通过EdU、Transwell等功能实验评估细胞表型，结合MeRIP-qPCR和双荧光素酶报告基因分析m6A修饰机制，并建立裸鼠移植瘤模型进行体内验证。

TMC5表达在COAD中显著上调

通过TIMER数据库分析发现TMC5在包括COAD在内的多种肿瘤中高表达。临床样本检测显示，COAD组织中TMC5 mRNA和蛋白水平分别是癌旁的3.2倍和2.8倍（P<0.001）。免疫组化证实TMC5阳性率在肿瘤组织达78.3%，显著高于正常组织的12.1%。

TMC5敲除抑制COAD恶性表型

在Caco-2和LoVo细胞系中，shRNA敲降TMC5使细胞增殖率下降62%（EdU实验），凋亡率增加3.5倍。Transwell实验显示迁移和侵袭能力分别降低71%和68%。值得注意的是，TMC5缺失导致铁死亡关键指标ROS和Fe²⁺水平上升2-3倍，同时铁蛋白重链FTH1和胱氨酸转运体xCT表达下调。

RBM15通过m6A修饰调控TMC5稳定性

SRAMP数据库预测TMC5 mRNA存在m6A修饰位点。实验证实RBM15可与TMC5 mRNA结合，其过表达使TMC5半衰期从4.2小时延长至7.8小时。双荧光素酶报告基因系统显示，突变m6A位点后RBM15对TMC5的激活效应消失。临床样本中RBM15与TMC5表达呈显著正相关（r=0.83, P<0.001）。

RBM15/TMC5轴调控机制验证

挽救实验证明，在RBM15敲降的细胞中回补TMC5可部分恢复增殖能力（EdU阳性率从38%回升至65%），并逆转铁死亡表型。动物实验显示，TMC5敲除使移植瘤体积缩小58%，重量减轻63%（P<0.01），免疫组化显示ki-67阳性率下降72%。

该研究首次阐明RBM15通过m6A依赖性机制维持TMC5 mRNA稳定性，进而促进COAD进展的分子通路。创新性发现TMC5同时调控EMT、糖酵解和铁死亡等多条致癌通路，为开发联合靶向治疗策略提供了理论依据。研究结果发表于《Hereditas》杂志，不仅为COAD预后评估提供了新的生物标志物组合（RBM15/TMC5），更揭示了m6A甲基化修饰在消化道肿瘤中的调控新机制，具有重要的转化医学价值。