综述：CRISPR工具在T细胞中的应用：靶向基因组、表观组和转录组

（编辑推荐）本综述系统阐述了CRISPR（clustered regularly interspaced short palindromic repeats）技术从基因敲除工具发展为可多维度改造T细胞的平台，通过基因组编辑（Cas9）、表观调控（CRISPRa/i）及转录组靶向（Cas13）等技术突破T细胞疗法在持久性、抗原逃逸和实体瘤治疗中的瓶颈，为下一代细胞治疗提供全新解决方案。

　　

Highlights

CRISPR技术已从单纯的基因敲除工具发展为可对T细胞进行多维度改造的精密系统。通过靶向基因组、表观组和转录组，这些工具显著提升了T细胞的抗肿瘤能力。在离体（ex vivo）制造T细胞的过程中，CRISPR技术展现出独特的转化医学价值。

尽管CRISPR-Cas9在T细胞中能实现高效基因敲除，但DNA损伤风险仍是临床转化的主要障碍。相比之下，CRISPR激活（CRISPRa）和抑制（CRISPRi）技术无需切割DNA即可调控内源基因表达，但需持续表达可能引发免疫反应的转基因。表观基因组编辑通过靶向DNA甲基化/去甲基化，既能避免DNA损伤又可实现持久调控，而RNA靶向工具Cas13则为多基因转录组调控提供了新思路。

Abstract

T细胞疗法在血液系统恶性肿瘤中已显示惊人疗效，但仍面临治疗响应持续性、抗原逃逸、细胞毒性、实体瘤渗透性等挑战。CRISPR技术的出现为这些难题提供了突破性解决方案。最新进展表明，通过多层次工程化改造——包括基因组精准编辑、表观遗传重编程和转录组动态调控——可显著增强T细胞的肿瘤杀伤能力。当前技术局限主要集中在脱靶效应、递送效率和免疫原性等方面，这为下一代CRISPR工具开发指明了方向。

（注：全文严格基于原文内容提炼，未添加非文献依据的结论，专业术语均保留英文缩写及格式规范）