猪血管紧张素转换酶2作为辅助受体增强传染性胃肠炎病毒入侵与复制的机制研究

本研究揭示了猪血管紧张素转换酶2（pACE2）在传染性胃肠炎病毒（TGEV）感染中的关键作用：通过免疫共沉淀和生物信息学建模证实pACE2与TGEV-S1蛋白互作，其Q556残基是结合关键位点；功能实验证明pACE2以猪氨基肽酶N（pAPN）依赖性方式作为辅助受体促进TGEV入侵，为冠状病毒跨种感染机制提供了新见解。

　　

Highlight

猪ACE2（pACE2）作为传染性胃肠炎病毒（TGEV）的辅助受体，通过依赖pAPN的机制增强病毒入侵与复制。

pACE2在7日龄仔猪小肠绒毛顶端高表达

通过qRT-PCR分析发现，梅山猪空肠组织中pACE2表达在7日龄达到峰值（图1A）。免疫组化显示pACE2主要分布于空肠绒毛顶端（图1B），这与TGEV主要感染2周龄内仔猪的流行病学特征高度吻合。

功能实验验证pACE2促进TGEV感染

使用ACE2抑制剂DX600或抗pACE2抗体阻断细胞表面pACE2后，TGEV复制显著受抑。基因敲除实验进一步证实pACE2缺失会抑制病毒早期感染，而回补pACE2则能恢复感染效率。

分子互作机制解析

免疫共沉淀揭示pACE2与TGEV-S1蛋白直接结合，生物信息学模型预测pACE2-TGEV-S1-RBD界面存在强结合倾向。点突变实验锁定pACE2的Q556为关键结合残基。值得注意的是，人ACE2（hACE2）对TGEV入侵无显著影响。

pAPN依赖性机制

研究发现pACE2对TGEV入侵的促进作用完全依赖猪氨基肽酶N（pAPN）的存在，这再次确认pAPN是TGEV的主要入侵受体。

Conclusion

本研究首次阐明pAPN作为TGEV主要受体的同时，pACE2以辅助受体身份通过形成"pAPN-pACE2"协同受体系统增强病毒感染，为冠状病毒受体利用策略提供了新模式。