综述：植物抗病毒RNA干扰的复杂性及其与其他生物过程的互作

这篇综述系统梳理了植物抗病毒RNA干扰（RNAi）领域的最新进展，重点阐述了非经典通路（如RdDM和PTGS）、新型调控因子（DCL/AGO/RDR家族）、上下游信号网络（如miRNA-AGO2级联）以及外源dsRNA应用（喷雾/转基因）的前景与挑战。文章创新性地提出RNAi与表观遗传（RdDM）、细胞区室化（dicing bodies）及跨界调控（植物-昆虫-微生物）的互作机制，为开发基于RNAi的作物抗病毒策略提供了理论框架。

　　

植物抗病毒RNA干扰的复杂网络

经典与非经典通路交织

植物通过RNA干扰（RNAi）这一古老防御机制对抗病毒入侵。经典通路依赖DCL2/4切割病毒双链RNA（dsRNA）生成21-24nt病毒siRNA（vsiRNA），经AGO1/2装载形成RNA诱导沉默复合体（RISC）。近年研究发现，非经典通路如RNA指导的DNA甲基化（RdDM）途径中，DCL3产生的24nt siRNA通过AGO4介导转录沉默；而外源喷洒的dsRNA可被加工成非典型长度siRNA（如16-18nt），暗示存在未知加工机制。

调控因子的多维博弈

核心RNAi组分呈现动态调控：DCL3在叶绿体形成"切割小体"（dicing bodies）增强效率；RDR6天然变异体（如水稻OsRDR6^K152E）赋予广谱抗性；AGO2的PTM修饰（磷酸化/泛素化）调控其稳定性。病毒则进化出反制策略，如P0蛋白劫持宿主泛素化系统降解AGO1。有趣的是，植物miRNA-168通过调控AGO1表达形成负反馈环路，而某些病毒（如番茄斑萎病毒）竟能利用宿主miRNA（如miR159）促进自身传播。

跨界RNA战争

植物产生的vsiRNA可通过外泌体进入昆虫媒介（如蚜虫），沉默其关键基因（如COQ7）以阻断病毒传播。最新证据表明，根系分泌的siRNA可能调控根际微生物群，形成"第二基因组"防御层。这种跨界RNA交流为病虫害防控提供了新思路。

应用挑战与未来方向

尽管转基因表达或叶面喷洒dsRNA已展示抗病毒潜力（如对CMV防效达70%），但非经典siRNA的功能性、环境残留风险、纳米载体（如胍化siRNA颗粒）递送效率等瓶颈亟待突破。深度解析植物-病毒-媒介-微生物四元互作中的RNAi网络，将推动下一代智能抗病毒作物的设计。