余甘子果胶多糖PEP-1通过调控肿瘤相关巨噬细胞极化抑制肝癌的机制研究

本研究从余甘子中分离纯化获得分子量156.8 kDa的同型半乳糖醛酸聚糖（HG型果胶多糖PEP-1），通过GC-MS和NMR解析其α-1,4糖苷键连接结构。功能实验表明PEP-1能通过激活NF-κB/MAPK通路将M2型肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化为抗肿瘤M1表型，其条件培养基可诱导Hepa1-6细胞凋亡。动物实验证实PEP-1能靶向肿瘤微环境（TME）重塑免疫抑制状态，为肝癌免疫治疗提供新策略。

　　

Highlight

• PEP-1是分子量156.8 kDa的α-1,4-半乳糖醛酸聚糖

• 体外50-200 μg/mL浓度可诱导M2巨噬细胞向M1表型转化

• 通过激活NF-κB和MAPK磷酸化通路调控极化

• 200 mg/kg剂量能靶向肿瘤微环境（TME）重塑免疫抑制

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材料与试剂

余甘子干果购自赣南高原酒业有限公司，DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephacryl S-300 HR色谱柱来自GE Healthcare。单糖标准品（包括核糖、甘露糖等12种）购自阿拉丁公司。

提取与纯化

通过热水提取-乙醇沉淀获得粗多糖PEP（得率6.2%），经阴离子交换柱分离得PEP-S2组分（得率2.9%），最终通过凝胶色谱纯化获得主成分PEP-1。

Discussion

多糖的抗癌活性与其结构特异性密切相关。本研究首次阐明余甘子来源的HG型果胶多糖可通过双重机制发挥作用：直接激活巨噬细胞表面模式识别受体（PRRs），同时通过NF-κB/MAPK信号级联反应促进促炎因子分泌。值得注意的是，PEP-1在肿瘤组织中的靶向蓄积效应使其能精准调控肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的M1型极化。

Conclusion

本研究揭示PEP-1作为天然免疫调节剂，通过重塑免疫抑制性肿瘤微环境（TME）发挥抗肝癌作用。其独特的HG型结构为开发新型肿瘤免疫治疗药物提供了分子基础。