玉米ZmATG18a基因亚家族鉴定及其在干旱胁迫中的正向调控作用

【字体: 时间:2025年08月27日 来源:BMC Genomics 3.7

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  本研究针对玉米(Zea mays)自噬相关基因ZmATG18亚家族的功能未知问题,通过全基因组鉴定揭示了8个ZmATG18成员的进化特征与表达模式,重点解析了ZmATG18a通过维持ROS稳态增强干旱耐受性的分子机制。研究人员利用EMS和Mu突变体证明ZmATG18a高表达显著提升抗旱性(相对含水量提高21%,MDA含量降低35%),为玉米抗旱育种提供了新靶点。该成果发表于《BMC Genomics》,首次系统阐明了玉米ATG18亚家族的功能分化及其在非生物胁迫中的调控网络。

  

在气候变化加剧的背景下,干旱已成为制约玉米产量的关键因素。植物进化出复杂的应激机制应对水分短缺,其中自噬(autophagy)作为"细胞清道夫",通过降解受损组分循环利用养分。尽管拟南芥、番茄等模式植物中ATG18基因的功能已有研究,但在玉米这一全球重要作物中,ZmATG18亚家族的功能仍如"黑箱"般未知。更关键的是,自噬如何调控玉米干旱响应尚缺乏直接遗传证据。

为解开这些谜团,Wang Ziming团队在《BMC Genomics》发表了开创性研究。他们采用生物信息学与分子生物学相结合的策略:首先通过BLAST和结构域分析从B73基因组鉴定出8个ZmATG18成员;利用MEME和PlantCARE解析保守基序与顺式元件;基于RNA-seq数据绘制组织表达谱;通过PEG模拟干旱和qRT-PCR验证ZmATG18a的胁迫响应;最后借助EMS诱导的终止密码子突变体zmatg18a-1和Mu转座子激活突变体zmatg18a-2,在表型、生理指标(相对含水量、电解质渗漏率)和分子水平(SOD/POD活性、H2O2积累)系统评估了该基因功能。

主要研究发现

  1. 1.

    基因家族特征

    系统发育树显示ZmATG18a-d与拟南芥AtATG18a聚为保守分支,均含8个WD40重复基序。共线性分析发现三对片段复制基因(a/b、c/d、g/h),Ka/Ks<1表明纯化选择作用。启动子富含ABRE和MYB等应激响应元件,其中ZmATG18a含6个ABRE和1个DRE核心元件。

  1. 1.

    表达调控模式

    ZmATG18a/d/g呈现组成型高表达,而ZmATG18b/e表达量最低。ABA处理12小时后,根中ZmATG18b表达激增5.46倍。20% PEG胁迫下,叶片ZmATG18a表达4小时达峰值(3.25倍),与启动子应激元件分布高度吻合。

  2. 2.

    亚细胞定位特征

    ZmATG18a-GFP与自噬体标记蛋白mCherry-ATG8a共定位实验显示,该蛋白在细胞质形成点状结构并与自噬体膜共定位,证实其参与自噬体形成。

  1. 1.

    抗旱性机制

    zmatg18a-1突变体在干旱14天后存活率降低58%,叶片H2O2积累增加2.1倍;相反,ZmATG18a过表达的zmatg18a-2突变体SOD活性提高37%。DAB染色显示ROS清除能力与基因表达量呈正相关,表明ZmATG18a通过增强抗氧化系统维持氧化还原稳态。

研究意义

该研究首次建立了玉米ATG18亚家族"基因结构-表达调控-生理功能"的完整认知框架,突破性地证明ZmATG18a可通过双重机制增强抗旱性:一方面作为自噬体膜组分促进受损细胞器清除,另一方面通过转录激活抗氧化酶基因维持ROS平衡。作者特别指出,ZmATG18a启动子区密集的ABRE元件可能受ABA信号通路调控,这为解析植物激素与自噬的交叉调控网络提供了新线索。从应用角度看,该基因的分子标记和编辑靶点为培育"节水型"玉米品种提供了精准育种策略。

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