巨花茜草提取物通过调控线粒体功能障碍和糖酵解抑制弥漫性大B细胞淋巴瘤增殖及上皮-间质转化

本研究针对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)现有疗法局限性，首次揭示巨花茜草提取物(DGE)通过诱导线粒体功能障碍(抑制PINK1-PRKN通路)和抑制糖酵解，显著抑制DLBCL细胞增殖、迁移侵袭及上皮-间质转化(EMT)，并增强顺铂敏感性。该发现为DLBCL治疗提供新型天然药物候选，发表于《Hereditas》具有重要转化价值。

　　

研究背景

弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)作为非霍奇金淋巴瘤(NHL)最常见亚型，占病例30-35%。尽管R-CHOP方案(利妥昔单抗+环磷酰胺+阿霉素+长春新碱+泼尼松)使60%患者获益，但约半数出现复发耐药，亟需新型治疗策略。传统中药因其多靶点特性成为抗癌药物开发宝库，而茜草科植物巨花茜草(Damnacanthus giganteus)虽在瑶族医学中用于消炎镇痛，其抗肿瘤潜力尚未被科学验证。

关键方法

研究采用DLBCL细胞系SU-DHL4和正常B淋巴细胞GM12878，通过CCK-8、EdU、Transwell等技术评估DGE对增殖、凋亡、迁移侵袭的影响；借助裸鼠移植瘤模型验证体内疗效；采用MitoSOX Red、JC-1染色、ATP检测等分析线粒体功能；通过葡萄糖摄取和乳酸测定评估糖酵解水平；使用线粒体复合体I抑制剂Rotenone和ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)进行机制验证。

研究结果

1. DGE抑制DLBCL细胞增殖并增强DOX敏感性

低毒浓度DGE(25-100 μg/mL)显著抑制SU-DHL4增殖(IC₅₀=137.6 μg/mL)，其100 μg/mL效果与阳性对照阿霉素(DOX)相当。EdU和克隆形成实验显示DGE剂量依赖性抑制增殖能力，同时使DOX的IC₅₀值降低。

2. DGE抑制转移和EMT进程

Transwell实验表明DGE可减少50-60%的细胞迁移侵袭。Western blot显示其下调间质标志物N-钙黏蛋白和波形蛋白，上调上皮标志物E-钙黏蛋白，逆转EMT进程。

3. 体内协同抑制肿瘤生长

裸鼠实验中100 mg/kg DGE单药即显著抑制移植瘤体积，与1.5 mg/kg DOX联用效果更佳。免疫组化显示治疗组Ki67(增殖标记)和N-钙黏蛋白阳性细胞减少。

4. 调控线粒体功能与糖酵解

DGE处理导致线粒体ROS升高3倍、膜电位(MMP)下降40%、ATP产量减少65%，同时抑制葡萄糖摄取和乳酸生成。Western blot显示PINK1和Parkin蛋白表达下调，提示线粒体自噬受损。

5. 线粒体功能障碍的核心作用

使用线粒体抑制剂Rotenone可模拟DGE效应，而NAC能部分逆转DGE诱导的增殖抑制和EMT阻滞，证实ROS依赖性机制。

结论与意义

该研究首次阐明巨花茜草提取物通过双重破坏线粒体功能(ROS/MMP/ATP紊乱)和糖酵解抑制DLBCL进展，其作用机制涉及PINK1-PRKN通路调控。特别值得注意的是，DGE在增强标准化疗药物敏感性的同时保持低毒性，这种"化疗增敏剂"特性具有重要临床转化价值。研究为天然药物开发提供新思路，也为理解DLBCL代谢重编程与EMT的关联机制贡献新视角。未来需进一步解析DGE活性成分及其与线粒体-糖酵解交叉调控的具体分子靶点。