基于片状α-Fe2O3/Fe3O4磁性纳米复合材料与CRISPR/Cas13a系统的电化学RNA适体传感器:骨桥蛋白超灵敏检测新策略

【字体: 时间:2025年08月21日 来源:Bioelectrochemistry 4.5

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  本研究创新性地构建了基于片状α-Fe2O3/Fe3O4磁性纳米复合材料(MNCs)和CRISPR/Cas13a系统的电化学RNA适体传感器,实现了骨桥蛋白(OPN)的超灵敏检测(LOD 0.33 pg·mL?1)。该传感器通过磁性自组装技术和Cas13a的RNA剪切活性,将肿瘤标志物浓度转化为电信号变化,为癌症早期诊断提供了新思路。

  

Highlight

检测机制:该电化学RNA适体传感器的核心在于巧妙整合了三重生物分子识别机制。首先,骨桥蛋白(OPN)与适体(Apt)的高亲和力结合会解离双链RNA(Apt/Activator),释放激活剂(Activator)。随后,CRISPR/Cas13a系统在crRNA引导下识别Activator并激活其RNA剪切活性。最后,被激活的Cas13a酶剪切电极表面修饰的报告分子(MB标记的Reporter),产生可检测的电信号变化。

材料表征:通过水热法制备的片状α-Fe2O3/Fe3O4磁性纳米复合材料展现出独特的二维结构(厚度约25 nm)和优异的磁饱和强度(45.6 emu·g?1)。金纳米颗粒(AuNPs)修饰后的材料表面形成了理想的电子传输通道,其循环伏安曲线显示明显的氧化还原峰。

性能验证:传感器对OPN的检测线性范围跨越5个数量级(1 pg·mL?1–10 ng·mL?1),且能区分相似蛋白(如CEA和AFP)。7次重复实验的相对标准偏差仅0.75%,在血清样本中回收率达97.3–103.5%,证实了其临床适用性。

Conclusions

本研究成功开发了一种整合磁性纳米材料与CRISPR技术的创新检测平台。片状α-Fe2O3/Fe3O4不仅提供了磁控自组装特性,其特殊的电子结构更放大了电化学信号。而Cas13a系统的"激活-剪切"级联反应则实现了对OPN浓度的精准转换。该方法为发展新一代肿瘤标志物检测技术提供了范式转移。

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