基于RPA-CRISPR/Cas12a技术的百日咳杆菌快速检测方法建立

为解决百日咳杆菌(BP)检测依赖复杂设备的问题，研究人员开发了基于RPA-CRISPR/Cas12a技术的诊断平台。该技术结合重组酶聚合酶扩增(RPA)与CRISPR/Cas12a系统，采用免疫层析试纸条(ILFS)和荧光曲线双读值方式，检测限低至102 copies/μL，临床验证显示100%灵敏度和特异性，为资源有限地区提供了高效的床旁检测方案。

　　

百日咳（pertussis）是由百日咳杆菌(Bordetella pertussis, BP)引发的急性呼吸道传染病，对婴幼儿危害尤为严重。传统检测方法如细菌培养、分子生物学技术等依赖大型仪器，制约了临床普及。这项创新研究巧妙地将重组酶聚合酶扩增技术(RPA)与基因编辑神器CRISPR/Cas12a系统联姻，开发出双模式检测方案：既可通过免疫层析试纸条(ILFS)实现裸眼判读，又能借助荧光信号进行精确定量。

实验数据显示，该平台灵敏度惊人——最低可检出10² copies/μL的微量病原体，且与常见呼吸道病原体零交叉反应。在40例临床样本盲测中，与金标准qPCR达成100%完美吻合。更令人振奋的是，整个检测流程无需复杂设备，常温即可完成，像血糖仪一样适合基层医疗机构开展床旁检测(POCT)。

这项技术突破犹如为百日咳防控装上了"基因雷达"，将分子诊断的门槛从专业实验室拉到了社区诊所。其精准、便捷、低成本三大特性，不仅为临床医生提供了抗感染治疗的决策利器，更为公共卫生体系筑起了一道智能化的早期预警防线。