NF-κB抑制剂Ro 106-9920通过抑制中性粒细胞胞外诱捕网形成减轻缺血再灌注诱导的急性肾损伤

这篇研究揭示了NF-κB抑制剂Ro 106-9920（Ro）通过抑制中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）形成，显著改善缺血再灌注（I/R）诱导的急性肾损伤（AKI）。实验证实Ro能剂量依赖性地降低血清肌酐、尿素氮（BUN）和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）水平，减轻肾组织病理损伤和细胞凋亡，其机制与阻断NF-κB核转位及降低髓过氧化物酶（MPO）活性相关。该研究为AKI治疗提供了新靶点。

　　

Abstract

中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）被证实参与急性肾损伤（AKI）的恶化过程。Ro 106-9920（Ro）作为核因子κB（NF-κB）信号的有效抑制剂，可阻断NETs形成。本研究探讨Ro是否通过抑制NETs发挥对AKI的保护作用。通过30分钟双侧肾缺血再灌注建立AKI模型，经7天Ro或溶剂治疗后，收集小鼠血液和肾脏进行分析。结果显示，Ro以剂量依赖性方式显著降低AKI模型血清肌酐、NGAL、BUN及炎症因子水平，减轻肾组织形态学损伤、细胞凋亡和炎症反应。机制上，Ro抑制NF-κB核转位及MPO活性，表明其通过阻断NF-κB激活和NETosis发挥保护作用。

Introduction

AKI以尿量减少和/或血清肌酐升高为特征，在全球范围内发病率高，其中缺血再灌注（I/R）损伤是主要诱因。尽管治疗策略不断进步，AKI仍伴随高死亡率，且易进展为慢性肾病。研究表明，促炎细胞因子（如IL-1β、TNF-α、MPO和IL-6）在AKI中起关键作用。中性粒细胞作为免疫前线细胞，通过释放NETs（以DNA为骨架，结合瓜氨酸化组蛋白CitH3和MPO）加剧组织损伤。NETs在I/R相关疾病（如缺血性卒中、肢体I/R损伤和AKI）中促进疾病进展。Ro作为NF-κB抑制剂，其是否通过调控NETs保护AKI尚不明确。

Materials and methods

56只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组、假手术组和I/R组（含不同剂量Ro治疗亚组）。通过双侧肾动脉夹闭30分钟建立I/R模型，术后给予Ro（5、10、20 mg/kg/天）或溶剂治疗7天。检测血清肾功能指标（肌酐、BUN、NGAL）、肾组织病理评分（H&E染色）、细胞凋亡（TUNEL）、炎症因子（ELISA和qRT-PCR）及NF-κB通路蛋白（WB和IHC）。MPO活性和Cit-H3表达用于评估NETosis。

Results

1. Ro改善肾功能：I/R显著升高血清肌酐（AUC：对照100.893±6.537 vs. I/R 496.536±9.169）、BUN和NGAL水平，Ro剂量依赖性降低这些指标（20 mg/kg组肌酐AUC降至205.088±3.986），效果优于N-乙酰半胱氨酸（NAC）。

2. 减轻肾损伤：I/R导致肾小管刷状缘丢失、坏死和管型形成（病理评分11.0±1.732），Ro（20 mg/kg）使评分降至1.0±1.0。TUNEL显示Ro显著减少凋亡细胞（I/R组79.943±8.174 vs. Ro组1.310±0.497）。

3. 抑制炎症：Ro降低血清IL-1β（I/R 130.663±4.217 vs. Ro 36.848±2.578）、TNF-α和IL-6水平，并抑制肾组织内相应mRNA表达。

4. 阻断NF-κB激活：I/R增加肾组织NF-κB核转位（核NF-κB表达1.071±0.078 vs. 对照0.330±0.095），Ro（20 mg/kg）使其降至0.338±0.067。

5. 减少NETosis：I/R升高MPO活性（1.931±0.130 vs. 对照0.332±0.148）和Cit-H3表达（1.279±0.112 vs. 对照0.471±0.064），Ro剂量依赖性抑制这些变化。

Discussion

本研究首次证实Ro通过抑制NF-κB/NETs轴保护I/R-AKI。NF-κB激活促进NETosis，后者通过释放MPO和Cit-H3加剧肾损伤，形成恶性循环。Ro的干预打破这一循环，但其临床转化需进一步评估药代动力学和长期疗效（如是否阻止AKI向慢性肾病进展）。局限性包括未探讨Ro预处理效果及缺乏NETs直接可视化证据。未来需结合基因敲除模型和动态观察NETs形成过程。

Conclusion

Ro通过抑制NF-κB激活和NETosis，减轻I/R-AKI的炎症和凋亡，展现剂量依赖性保护作用，为AKI治疗提供新思路。