揭示DLG3介导的免疫抑制机制：基于M2样肿瘤相关巨噬细胞的乳腺癌分子特征与预后模型研究

这篇研究通过加权基因共表达网络分析（WGCNA）和一致性聚类，首次系统解析了乳腺癌中M2样肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的分子特征，构建了基于13个关键基因（含核心靶点DLG3）的预后模型（M2GRS），并证实其可预测免疫治疗响应。研究创新性揭示了DLG3通过抑制M1极化、促进M2极化塑造免疫抑制微环境（TME）的机制，为乳腺癌分层治疗提供了新靶点。

　　

研究背景

乳腺癌（BC）是全球女性最常见的恶性肿瘤，其异质性和治疗抵抗性与肿瘤微环境（TME）中M2样肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）的免疫抑制功能密切相关。尽管已有研究关注特定分子对M2巨噬细胞极化的影响，但M2样TAMs在乳腺癌患者分层中的系统性分子特征及其预后价值尚未明确。

方法学突破

研究整合TCGA和GEO数据库的1073例乳腺癌样本，通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）解析GSE176078队列中84,155个细胞的异质性，发现LYVE1⁺ M2巨噬细胞亚群与不良预后显著相关。采用WGCNA算法筛选出与M2巨噬细胞浸润相关的4863个基因模块，进一步通过一致性聚类将患者分为三个分子亚型（C1-C3）。机器学习（LASSO/RF）筛选出13个关键基因构建M2巨噬细胞相关风险评分（M2GRS），并在多队列中验证其预测效能。

分子亚型特征

• C1型：预后最佳，富集代谢通路（胆汁酸代谢）和基质浸润，以Luminal A为主。

• C2型：预后最差，高M2巨噬细胞浸润且呈现"免疫荒漠"表型，HER2过表达显著。

• C3型：基因组突变负荷最高，富含三阴性乳腺癌（TNBC）和T细胞浸润，具有免疫治疗潜力。

DLG3的核心机制

作为M2GRS模型中的关键基因，DLG3在乳腺癌组织中显著高表达且与晚期临床分期正相关。空间转录组和单细胞分析显示DLG3主要定位于恶性细胞，其表达与CD8⁺ T细胞浸润呈负相关（r=-0.42, p<0.001）。体外实验证实，敲低DLG3可抑制MDA-MB-231和SK-BR-3细胞的增殖、迁移（Transwell实验显示侵袭细胞数减少63%），并通过共培养体系下调THP-1源性巨噬细胞的M2标志物CD206表达（流式细胞术显示降低41%），表明DLG3通过促进M2极化塑造免疫抑制性TME。

临床转化价值

M2GRS在IMvigor210等免疫治疗队列中显示预测价值：低风险组患者对PD-1/L1抑制剂响应率提高2.1倍（p=0.003）。分子对接发现组蛋白去乙酰化酶抑制剂Panobinostat与DLG3蛋白结合能达-7.8 kcal/mol，为靶向治疗提供新策略。

创新性与展望

该研究首次建立M2样TAMs驱动的乳腺癌分子分型体系，阐明DLG3作为免疫检查点的非经典功能。未来需开展前瞻性临床试验验证M2GRS的临床应用价值，并深入探索DLG3调控巨噬细胞极化的表观遗传机制。