西达本胺联合安罗替尼通过PI3K/AKT信号通路协同抑制高级别B细胞淋巴瘤的机制研究

本研究针对MYC/BCL2/BCL6重排的高级别B细胞淋巴瘤(HGBL-DHL)临床治疗难题，通过表观遗传药物西达本胺(Chidamide)与多靶点抑制剂安罗替尼(Anlotinib)的联合应用，揭示了二者通过协同抑制HDAC3/VEGFR2-PI3K/AKT轴显著增强抗肿瘤效应的机制。研究团队采用体外细胞模型与异种移植小鼠实验，证实该组合可诱导细胞周期阻滞、凋亡及增殖抑制，为HGBL-DHL的精准治疗提供新策略。

　　

高级别B细胞淋巴瘤伴MYC和BCL2/BCL6重排(HGBL-DHL)是血液肿瘤领域的治疗难点，其侵袭性强、对标准化疗方案耐药，患者中位生存期不足2年。尽管强化化疗和干细胞移植等手段不断尝试，临床预后仍不理想。这种困境源于HGBL-DHL独特的分子特征——同时具备伯基特淋巴瘤(BL)的增殖活性和弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的生存优势，形成"双重打击"的恶性表型。近年来，表观遗传调控和血管生成信号通路的异常激活被证实是HGBL-DHL的关键致病机制，但如何通过多靶点干预实现协同治疗效果仍是未解难题。

厦门大学附属第一医院血液科和厦门大学医学院血液病研究所的研究团队在《Scientific Reports》发表的最新研究中，创新性地将组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)西达本胺与多靶点酪氨酸激酶抑制剂安罗替尼联合应用。研究发现，这两种药物通过分别靶向HDAC3和VEGFR2，实现对PI3K/AKT信号通路的双重阻断，显著抑制了HGBL-DHL的进展。

研究团队采用CCK-8法检测细胞活力、流式细胞术分析凋亡与周期、网络药理学预测靶点通路、RNA测序解析转录组变化、Western blot验证蛋白表达、以及异种移植小鼠模型评估体内疗效等关键技术方法。实验所用HGBL-DHL细胞系(TMD8、Toledo等)来自MD安德森癌症中心实验室，动物实验严格遵循ARRIVE指南。

Chidamide combined with anlotinib synergistically inhibit HGBL-DHL by proliferation inhibition, apoptosis and cell cycle arrest inducement in vitro

研究发现西达本胺单药即可剂量依赖性地抑制细胞增殖，而联合安罗替尼后协同指数(CI)多低于1.0。在TMD8细胞中，1.6μM安罗替尼使375nM西达本胺的凋亡率从25.03%提升至42.9%；在Toledo细胞中，联合用药组凋亡率较单药提升337.9%。细胞周期分析显示联合组S期细胞比例显著降低，G1期(TMD8)或G2期(Toledo)阻滞增强。

Chidamide combined with anlotinib mostly affects the PI3K/AKT signaling pathway in silico and in transcriptional level in vitro

网络药理学预测PI3K/AKT为最显著富集通路。RNA测序证实联合组协同下调AKT1、MYC、BCL2等基因，KEGG分析显示差异基因富集于细胞周期和凋亡通路。GO分析揭示西达本胺单药主要影响转录调控相关通路。

Downregulation of HDAC3 and VEGFR2 mediated by chidamide and anlotinib synergistically induces PI3K/AKT signaling pathway inhibition,proliferation inhibition,and apoptosis in vitro

Western blot显示联合组显著降低PI3K110δ、p-AKT^Ser473等蛋白表达。HDAC3/VEGFR2过表达实验证实二者是药物作用的关键靶点——转染HDAC3/VEGFR2质粒可逆转联合用药的增殖抑制和促凋亡效应。

Chidamide combined with anlotinib synergistically inhibits tumor growth in a HGBL-DHL xenograft mouse model

在TMD8异种移植模型中，联合用药组肿瘤体积和重量较单药组显著减小，生存期延长且未出现明显毒性。HE染色显示联合组肿瘤细胞密度最低且坏死最显著。

Inhibition of HDAC3 and VEGFR2 induced by chidamide and anlotinib dually led to PI3K/AKT signaling pathway inhibition in vivo

免疫组化和Western blot证实联合组肿瘤组织中HDAC3阳性细胞和VEGFR2阳性血管减少，PI3K/AKT通路蛋白及其下游c-Myc、BCL-2等效应分子表达同步下调。

该研究首次阐明西达本胺与安罗替尼协同作用的分子机制：西达本胺通过抑制HDAC3，安罗替尼通过阻断VEGFR2磷酸化，共同导致PI3K/AKT信号级联的双重抑制。这种协同作用使得增殖相关蛋白c-Myc、抗凋亡蛋白BCL2/MCL1、周期蛋白Cyclin A2等关键效应分子表达同步下调，从多维度遏制肿瘤进展。研究不仅为HGBL-DHL提供了具有转化潜力的联合治疗方案，更创新性地揭示了表观遗传调控与血管生成信号通路的交叉对话机制。基于两种药物已获批的临床适应症和本研究揭示的互补药代动力学特征，该方案具有较高的临床转化可行性，为改善HGBL-DHL患者预后带来新希望。