外泌体lncRNA SCAMP1-AS1通过调控LKB1-AMPK信号通路增强骨肉瘤恶性进展的机制研究

本研究针对骨肉瘤(OS)治疗困境，揭示了外泌体递送的lncRNA SCAMP1-AS1通过抑制LKB1-AMPK信号通路促进肿瘤恶性表型的关键机制。研究人员通过临床样本分析、细胞功能实验及动物模型证实，沉默SCAMP1-AS1可显著抑制OS细胞增殖、迁移和侵袭，为开发基于外泌体lncRNA的OS靶向治疗提供了新策略。

　　

骨肉瘤作为最常见的原发性恶性骨肿瘤，好发于青少年快速生长期，尽管手术联合化疗使无转移患者5年生存率达80%，但转移患者生存率仍低于20%。这种严峻的临床现状亟需揭示OS进展的分子机制以开发新型治疗靶点。近年来，外泌体作为细胞间通讯的关键媒介备受关注，其携带的长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤发生发展中发挥重要作用，但外泌体lncRNA在OS中的调控机制仍存在大量未知。

华中科技大学同济医学院附属梨园医院康复医学科的研究团队在《Scientific Reports》发表的研究，首次揭示了外泌体lncRNA SCAMP1-AS1通过调控LKB1-AMPK信号通路促进OS恶性进展的分子机制。研究采用生物信息学分析结合15对临床样本验证，发现SCAMP1-AS1在OS组织和细胞系中显著高表达；通过细胞功能实验、外泌体共培养体系和裸鼠移植瘤模型，证实SCAMP1-AS1沉默可抑制OS恶性表型；进一步机制研究发现该效应通过激活LKB1-AMPK-mTOR信号通路实现。

关键技术方法包括：从OS细胞系分离鉴定外泌体（透射电镜和CD9/CD81标志物检测）；qRT-PCR检测基因表达；CCK-8和EdU法分析细胞增殖；Transwell实验评估迁移侵袭能力；Western blotting检测LKB1-AMPK通路蛋白表达；建立裸鼠移植瘤模型验证体内效应。

LncRNA SCAMP1-AS1表达在OS组织和细胞系中增强

通过分析GSE218526数据集和TNMplot数据库，结合15对OS临床样本验证，发现SCAMP1-AS1在OS组织和细胞系（Saos-2、U2OS等）中表达显著高于正常对照。外泌体分离鉴定显示，OS来源外泌体中SCAMP1-AS1富集程度明显高于正常成骨细胞hFOB1.1。

SCAMP1-AS1沉默抑制OS细胞增殖、迁移和侵袭

采用siRNA沉默SCAMP1-AS1后，CCK-8和EdU实验显示OS细胞增殖能力显著降低，Transwell实验证实迁移侵袭能力下降。临床相关性分析发现SCAMP1-AS1高表达与Enneking分期（III期）和转移显著相关。

OS细胞来源外泌体增强靶细胞恶性表型

外泌体与OS细胞共培养实验表明，外泌体能显著促进受体细胞增殖、迁移和侵袭，并伴随SCAMP1-AS1表达上调。而来自SCAMP1-AS1沉默细胞的外泌体则能逆转这种促癌效应。

LKB1-AMPK通路是SCAMP1-AS1的下游靶点

生物信息学预测结合实验验证发现，SCAMP1-AS1通过抑制LKB1-AMPK信号通路发挥作用：OS外泌体处理会降低LKB1和磷酸化AMPK(p-AMPK)水平，增加磷酸化mTOR(p-mTOR)；而SCAMP1-AS1沉默可逆转这些变化。救援实验证实，同时沉默LKB1能抵消SCAMP1-AS1沉默的抗肿瘤效应。

该研究首次阐明外泌体递送的SCAMP1-AS1通过抑制LKB1-AMPK通路促进OS进展的分子机制，不仅为理解OS恶性进展提供了新视角，更为开发基于外泌体lncRNA的OS诊断标志物和治疗靶点奠定了理论基础。特别值得注意的是，研究中采用的外泌体递送siRNA策略，为OS的靶向治疗提供了潜在的新型给药系统。未来研究可进一步探索SCAMP1-AS1与LKB1-AMPK通路相互作用的具体分子机制，以及其在OS化疗耐药中的作用。