水母毒素NnTX-45的纯化鉴定及其溶血机制研究：为开发抗毒血清提供关键抗原

本研究成功建立改进的霞水母（Nemopilema nomurai）毒素提取方法，首次纯化获得45 kDa溶血毒素NnTX-45（HC50≈30 μg/mL），通过透射电镜揭示其通过形成5.65 nm内径的膜孔结构引发溶血，为水母蜇伤治疗提供高纯度抗原。该成果突破传统提取技术瓶颈，填补了剧毒水母溶血机制研究空白。

　　

Highlight

本研究突破性地建立改良版水母毒素提取方案，成功从"杀人水母"霞水母（Nemopilema nomurai）中分离出关键溶血毒素NnTX-45，首次揭示其通过纳米级膜孔形成机制导致红细胞溶解，为开发特效抗毒血清奠定基础。

Section snippets

Chemicals and instrumentation

所有试剂购自Solarbio科技公司（中国北京），实验使用日本日立HT7700透射电子显微镜。

Pretreatment of N. nomurai tentacles

捕获霞水母后立即剪取触手，4℃保存。沉淀物经PBS缓冲液反复清洗后，剩余触手保存于-80℃超低温环境。

Extraction and refinement of jellyfish N. nomurai toxins

冻存触手经特殊解冻处理后，采用创新性分级提取技术获得高纯度粗毒，显著降低15-40 kDa区段杂蛋白干扰。

SDS-PAGE analysis of N. nomurai

改良法提取的毒素溶液澄清透明，SDS-PAGE显示蛋白条带数量较传统方法显著减少（图1A），关键毒素组分如溶血素和磷脂酶A₂（PLA₂）得以保留。

Discussion

霞水母在亚洲海域周期性暴发，其毒素可引发从皮肤灼痛到多器官损伤的复杂症状。本研究揭示的NnTX-45膜孔形成机制（内径5.65 nm/外径13 nm）为解释其强溶血活性提供直接证据，填补该物种毒素作用机制研究空白。

Conclusion

通过凝胶层析联合阴离子交换色谱成功纯化NnTX-45（HC₅₀≈30 μg/mL），电镜观测首次捕获其诱导红细胞膜形成特征性纳米孔洞的过程，为抗毒血清研发提供关键抗原。