SIGLEC15通过调控ZEB1抑制三阴性乳腺癌EMT进程并重塑免疫抑制微环境的机制研究

本研究针对三阴性乳腺癌(TNBC)免疫治疗响应异质性和转移机制不明的问题，通过多组学分析结合体内外实验，揭示SIGLEC15通过下调ZEB1抑制上皮-间质转化(EMT)，同时通过调节CD4+/CD8+T细胞浸润形成免疫抑制微环境。发现Nutlin-3a对高表达SIGLEC15的肿瘤具有显著抑制作用，为TNBC分层治疗提供新策略。

　　

乳腺癌尤其是三阴性乳腺癌(TNBC)的治疗一直是临床面临的重大挑战。尽管免疫治疗为晚期患者带来希望，但疗效存在显著异质性。同时，肿瘤转移过程中上皮-间质转化(EMT)的调控机制尚未完全阐明。近年来，唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素15(SIGLEC15)被发现在多种实体瘤中具有免疫调节作用，但其在乳腺癌特别是TNBC中的双重功能仍不清楚。

重庆医科大学附属第一医院乳腺甲状腺外科的研究团队通过整合TCGA、GEO等公共数据库的RNA测序数据，结合单细胞转录组测序(scRNA-seq)和体内外功能实验，系统揭示了SIGLEC15在TNBC中的分子机制和临床意义，相关成果发表在《Genes》杂志。

研究采用的主要技术包括：基于TCGA和GEO数据库的批量转录组分析；来自GSE176078和GSE190772数据集的单细胞RNA测序；免疫组化检测64例临床样本；通过慢病毒载体构建SIGLEC15过表达/敲除的BT549和MB231细胞系；Transwell迁移侵袭实验、伤口愈合实验等体外功能验证；以及裸鼠异种移植模型评估药物敏感性。

更高SIGLEC15与BRCA患者更好预后相关

分析显示SIGLEC15在乳腺癌早期阶段(T1期)高表达，且与患者更长生存期显著相关。免疫组化证实其在管腔型乳腺癌中表达高于HER2阳性和基底样亚型，提示其表达水平可作为恶性程度评估指标。

SIGLEC15影响BRCA的TME组成

ESTIMATE分析发现SIGLEC15高表达组(SHES)具有更多免疫和基质细胞浸润。单细胞测序揭示SHES中恶性细胞比例升高而Treg和CD8⁺Tem细胞减少，CellChat分析显示其细胞间互作强度和数量均降低。

SIGLEC15表达损害T细胞浸润

hdWGCNA鉴定出与T细胞激活相关的S1基因模块在SHES中下调。临床样本验证显示SIGLEC15与CD4/CD8呈负相关，与免疫抑制标志物PD-1、FOXP3正相关，证实其抑制T细胞功能。

SIGLEC15通过下调ZEB1抑制EMT

过表达SIGLEC15的TNBC细胞中EMT关键转录因子ZEB1及下游N-cadherin、Vimentin表达降低，迁移侵袭能力减弱。单细胞轨迹分析发现SHES中分化潜能高的T1亚群比例增加，EMT通路活性降低。

SIGLEC15调控TNBC增殖及治疗策略

功能实验证实SIGLEC15过表达抑制细胞增殖并降低Cyclin D1表达。药物筛选发现MDM2抑制剂Nutlin-3a对SHES效果显著，而卡铂对低表达组更有效，裸鼠实验验证了这一治疗策略。

该研究首次系统阐明SIGLEC15在TNBC中的双重作用机制：一方面通过ZEB1/EMT轴抑制肿瘤转移，另一方面通过调节T细胞功能形成免疫抑制微环境。这一发现不仅解释了既往研究中SIGLEC15与预后的矛盾关联，更重要的是提出了基于SIGLEC15表达水平的精准治疗策略——高表达患者可能受益于Nutlin-3a靶向治疗，而低表达患者更适合免疫治疗或铂类化疗。研究为TNBC的分子分型和个体化治疗提供了新的生物标志物和干预靶点，具有重要的临床转化价值。