心肌梗死新型生物标志物MIRECD的发现：通过调控MLKL介导的程序性坏死预测预后

本研究针对心肌梗死(MI)预后评估的临床需求，通过Circle-Seq技术首次在患者血浆中发现染色体外环状DNA（eccDNA）MIRECD，证实其通过调控MLKL介导的程序性坏死加重心肌损伤，队列研究显示高表达MIRECD患者主要不良心脏事件(MACEs)风险增加2.72倍，为MI风险分层提供了新型分子标志物。

　　

心肌梗死作为全球首要致死病因，其预后评估始终是临床难点。尽管心脏肌钙蛋白(cTn)和B型利钠肽(BNP)已被纳入指南，但现有标志物对心肌细胞死亡机制的表征仍显不足。近年来，染色体外环状DNA(eccDNA)在肿瘤等疾病中展现出生物标志物潜力，但其在心血管领域的价值尚属空白。南京医科大学附属第二医院和苏州大学附属第二医院的研究团队通过创新性研究，首次揭示eccDNA在心肌梗死中的关键作用，相关成果发表于《Research》。

研究采用Circle-Seq、Sanger测序、细胞功能实验和515例前瞻性队列等关键技术。通过比较心肌梗死患者与健康人血浆样本，发现特异性高表达的eccDNA分子MIRECD；体外实验证实其通过上调混合谱系激酶结构域样蛋白(MLKL)加重心肌细胞程序性坏死；临床随访证实MIRECD可独立预测主要不良心脏事件(MACEs)。

研究结果部分：

1. "The landscape of eccDNA in MI"：通过全基因组Circle-Seq鉴定出8,283个eccDNA，其中1,424个在心肌梗死组差异表达，功能富集显示其与细胞连接等心血管相关通路密切相关。

2. "Identification of MIRECD in MI"：筛选获得位于chr6:4774194–4774429的特异性环状DNA MIRECD，Sanger测序验证其环化位点(CATAATAGCCTTAC)，qPCR证实其在心肌梗死患者血浆中显著高表达。

3. "Functional study of MIRECD"：AC16细胞实验显示MIRECD转染使MLKL mRNA表达增加3.1倍，Western blot验证蛋白水平同步上调；通过流式细胞术、TUNEL和Hoechst-PI染色证实MIRECD通过MLKL使心肌细胞程序性坏死率增加2.4倍。

4. "Cohort study of patients with MI"：515例患者36个月随访显示，高MIRECD组心血管死亡率显著升高(HR=3.77)，多因素Cox回归证实其独立预测价值(HR=2.72)，使风险模型的C-index从0.862提升至0.877。

该研究首次建立eccDNA与心肌梗死的分子联系，阐明MIRECD-MLKL-程序性坏死轴的作用机制。相较于传统标志物，MIRECD展现出更优的风险再分类能力(NRI=0.8914)，为心肌梗死精准诊疗提供新靶点。值得注意的是，研究也指出MIRECD在动物模型的验证缺失等局限，为后续研究指明方向。这项开创性工作不仅拓展了对eccDNA生物学功能的认识，更为心血管疾病液体活检开辟了新途径。