色胺功能化脂质纳米载体共递送SMO/BRD4抑制剂协同治疗髓母细胞瘤

为解决髓母细胞瘤(MB)治疗中血脑屏障穿透性差和癌症干细胞(CSC)耐药难题，中国药科大学团队开发了色胺修饰的纳米载体(Try-Lip NPs)，共递送SMO抑制剂SSB1与BRD4抑制剂JQ1。该研究证实双药通过协同抑制GLI/MYC通路显著降低肿瘤负荷和转移，为MB靶向治疗提供新策略。

　　

髓母细胞瘤(MB)作为儿童最常见的恶性脑肿瘤，当前治疗面临三大困境：手术难以彻底清除、放疗化疗导致神经认知损伤、30%患者出现复发转移。更棘手的是，血脑屏障(BBB)像坚固的"城门"阻挡药物进入，而肿瘤内的癌症干细胞(CSC)又像"顽固种子"驱动耐药和转移。面对这些挑战，中国药科大学的研究团队将目光聚焦在两条关键通路上——SHH信号通路中的SMO蛋白和表观调控因子BRD4，他们创新性地将传统中药柴胡提取物SSB1与靶向药物JQ1联用，并设计出能穿透BBB的"纳米特洛伊木马"。

研究人员首先通过全基因组测序分析发现，约30%的MB患者属于SHH亚型，其GLI转录因子异常激活；另有25%的Group 3亚型存在MYC基因扩增。这两种致癌驱动因子就像肿瘤的"总开关"，不仅促进增殖还会维持干细胞特性。团队从天然药物中筛选出SMO抑制剂SSB1，其抑制效果比临床药物GDC-0449强20倍（IC₅₀ 4.1 μM vs 94.5 μM）。更关键的是，当SSB1与能阻断BRD4-MYC通路的JQ1联用时，产生显著的协同效应（CI<0.8），使肿瘤细胞周期阻滞在G₀/G₁期的比例提升至73.7%。

为突破BBB递送屏障，团队设计出含色胺的脂质纳米粒(Try-Lip NPs)。这种直径79.22 nm的球形颗粒搭载双药后，通过有机阳离子转运体(OCT2)介导的内吞作用，使脑部药物浓度提升8.7倍。纳米载体在肿瘤微环境中还能响应谷胱甘肽(GSH)释放药物，实现"智能爆破"。

研究亮点体现在三方面：

1. 双药协同机制：通过下调GLI1/2和MYCN表达，使CD15⁺干细胞标志物OCT4/SOX2降低60%，并减少MMP2介导的转移

2. 纳米递送创新：Try修饰使BBB穿透效率提升5倍，肿瘤部位JQ1浓度达0.28 ng/mg

3. 安全性优势：治疗组小鼠体重稳定，未见肝毒性

关键技术包括：

• 流式分选CD15⁺ MB干细胞

• 正交实验优化纳米制剂(载药量9.3%)

• 建立原位MB小鼠模型（NSG小鼠小脑注射）

• LC-MS/MS定量组织分布

• 转录组分析SHH通路相关基因

【SSB1抑制效能超越临床药物】

通过MTT实验发现，SSB1对DAOY细胞的IC₅₀仅为GDC-0449的1/23。当SMO基因被siRNA敲除后，SSB1效果显著减弱，证实其作用靶点特异性。

【双药协同阻断恶性循环】

qPCR显示JQ1+SSB1使GLI1 mRNA降低82%，连带下游MYCN、CYCLIN D1同步下调。这种"双靶点阻断"使细胞凋亡率升至66.5%，远超单药组(49.3%)。

【纳米载体突破递送壁垒】

体外BBB模型证实Try-Lip NPs的跨膜效率提高3倍。活体成像显示Cy5.5标记的纳米粒在肿瘤部位富集，与GFP标记的MB细胞共定位。

【原位模型验证疗效】

治疗21天后，双药纳米组肿瘤荧光信号减弱90%。免疫组化显示Ki67阳性细胞减少，cleaved caspase-3增加，证实肿瘤增殖受抑。

这项发表于《BIOMATERIALS RESEARCH》的研究开创性地将传统中药活性成分与现代靶向治疗结合，通过精巧的纳米工程设计解决递送难题。其重要意义在于：

1. 为MB提供兼顾疗效与安全性的治疗方案，避免放疗导致的神经损伤；

2. 证实调控GLI-MYC轴可同时抑制肿瘤增殖、干细胞维持和转移；

3. 建立可推广的BBB穿透载体平台，为其他脑部疾病治疗提供参考。团队特别指出，Try-Lip NPs的转化前景广阔，下一步将开展GMP条件下制剂工艺优化。