基于Gs12-18 Cas12a直系同源蛋白的CRISPR可视化检测新技术：高灵敏度诊断新型鸭呼肠孤病毒

本研究创新性地利用Cas12a直系同源蛋白Gs12-18开发了LAMP-CRISPR/Gs12-18检测平台，通过比较Gs12-16与Gs12-18的trans-切割活性，证实Gs12-18具有更广的PAM识别范围和温度适应性。该技术针对NDRV S3基因实现38拷贝/反应的超高灵敏度可视化检测，为禽类病毒早期防控提供了无需复杂设备的现场检测方案。

　　

亮点

本研究通过系统比较两种Cas12a直系同源蛋白（Gs12-16和Gs12-18）的酶学特性，发现Gs12-18具有更优异的trans-切割活性和更广的PAM识别范围，为开发高灵敏度核酸检测工具提供了新选择。

讨论

RAVI-CRISPR技术在病毒检测领域已成为研究热点，尤其在应对突发疫情时需要快速、精准的诊断工具。本研究发现Gs12-18不仅能识别更丰富的PAM序列（图2、3和附表S1），还在更宽温度范围内保持稳定活性，这使其特别适合开发现场检测技术。

结论

基于LAMP-CRISPR/Gs12-18构建的检测平台，实现了对NDRV S3基因的可视化检测，灵敏度达38拷贝/反应。该技术突破了传统PCR需要精密仪器的限制，为禽类养殖业提供了革命性的即时检测（POCT）方案。