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克氏原螯虾前列腺素E2合成酶(PcPGES)基因的克隆及其在卵巢发育中的调控机制研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年08月09日 来源:Aquaculture 3.9
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本研究首次克隆了克氏原螯虾前列腺素E2合成酶(PGES)基因全长cDNA序列,通过qRT-PCR、FISH、IHC等技术证实PcPGES通过调控PGE2合成参与卵巢发育,为解决克氏原螯虾规模化育苗中卵巢发育不同步问题提供了新思路。
Highlight
本研究成功从克氏原螯虾中克隆获得PcPGES基因全长cDNA序列(1678 bp),编码410个氨基酸。生物信息学分析显示PcPGES蛋白具有硫氧还蛋白(TRX)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)结构域,属于胞质型PGES(cPGES)。
组织分布特征
qRT-PCR检测发现PcPGES在肌肉、心脏和卵巢中高表达。特别值得注意的是,在卵巢发育V期呈现显著表达高峰,提示其与生殖功能密切相关。
功能验证实验
通过RNA干扰(RNAi)和地塞米松(DEX)注射实验证实:抑制PcPGES会显著降低卵巢中PGE2含量,并下调PcCOX、PcVg等生殖相关基因表达。而注射花生四烯酸(AA)和PGE2则产生相反效果,直接促进卵母细胞发育。
定位研究
荧光原位杂交(FISH)和免疫组化(IHC)精确定位显示,PcPGES mRNA和蛋白主要分布在卵母细胞胞质中,这种亚细胞定位特征与其参与类二十烷酸代谢的功能高度吻合。
Conclusion
本研究首次系统阐明了PcPGES通过AA-COX-PGES-PGE2信号通路调控克氏原螯虾卵巢发育的分子机制,为水产养殖中实现同步化育苗提供了重要理论依据。
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