SRSF3通过相分离调控肺癌免疫与铁死亡：新型诊断治疗靶点的发现

本研究针对肺癌高发病率与死亡率现状，揭示了剪接因子SRSF3通过液-液相分离（LLPS）调控肿瘤进展的新机制。研究人员通过TCGA队列分析发现SRSF3是唯一与肺癌预后显著相关的SR蛋白家族成员，证实其通过p53信号通路、糖酵解途径及m6A修饰参与肿瘤进程，并与免疫检查点（PD-1/CTLA-4）和铁死亡（GPX4）密切相关。FRAP实验首次证实SRSF3具有动态相分离特性，为肺癌靶向治疗提供了新方向。

　　

肺癌作为全球第二大高发恶性肿瘤，每年造成约180万人死亡，其中非小细胞肺癌（NSCLC）占比达85%。尽管靶向治疗（如EGFR-TKIs）和免疫检查点抑制剂（ICIs）显著改善了患者生存，但耐药性和缺乏普适性靶点仍是临床难题。近年来，RNA剪接异常与肿瘤的关系日益受到关注，其中富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子家族（SRSFs）被发现在多种癌症中异常表达，但其在肺癌中的具体机制尚未阐明。

来自中国的研究团队通过TCGA数据库分析了1017例肺癌样本中12种SRSF家族成员的表达谱，发现SRSF3是唯一与患者预后独立相关的成员。进一步研究揭示，SRSF3通过调控405个差异表达基因（如SFTA2、TP63）影响p53信号通路和糖酵解过程。更引人注目的是，该研究首次证实SRSF3与m⁶A甲基化酶（METTL3/METTL14）和铁死亡关键基因（GPX4/DPP4）存在显著相关性，并通过免疫荧光和FRAP技术证实SRSF3在细胞核内形成具有动态恢复能力的相分离凝聚体——这些直径约1-3μm的液滴能自发融合与分裂，其恢复半衰期约30秒。功能实验显示，敲低SRSF3可抑制肺癌细胞迁移（Transwell实验显示减少62%）和克隆形成（下降71%）。

关键技术方法包括：1）基于TCGA的1017例肺癌样本生物信息学分析；2）通过GDSC数据库预测药物敏感性；3）FRAP实时成像追踪SRSF3凝聚体动力学；4）免疫共沉淀验证蛋白互作网络；5）体外Transwell和克隆形成实验评估细胞表型。

主要研究结果

1. SRSFs在肺癌中的表达与突变

   TCGA数据分析显示，除SRSF4/6/7/8外，其余SRSFs在肺癌组织均显著高表达（p<0.001），但仅SRSF3突变频率（1.2%）与预后显著相关（HR=1.34, 95%CI:1.01-1.78）。

2. SRSF3调控的分子网络

   KEGG分析发现SRSF3靶基因富集于p53通路（调整p=3.2×10^-5）和糖酵解（调整p=7.8×10^-4）。与m⁶A"写入酶"METTL3的强相关性（r=0.82）提示其可能参与RNA表观调控。

3. 免疫微环境与治疗敏感性

   高表达SRSF3样本显示CD4⁺ T细胞浸润减少（p=0.003），且与PD-L1（CD274）表达负相关（r=-0.41）。药敏分析揭示其对顺铂敏感性显著高于EGFR-TKIs（ΔIC₅₀=1.8μM）。

4. 相分离的生物学验证

   IUPred3预测显示SRSF3含有长片段无序区域（残基50-132）。FRAP实验证实其核内凝聚体10分钟内恢复70%荧光强度，符合液滴特征（τ=45±12s）。

这项发表于《Scientific Reports》的研究首次建立了SRSF3相分离-铁死亡-免疫调控的分子轴，为肺癌精准治疗提供了三重靶向策略：针对SRSF3相分离的小分子抑制剂、联合铁死亡诱导剂和ICIs的协同治疗方案，以及基于SRSF3表达水平的化疗药物选择指导。特别值得注意的是，SRSF3与m⁶A修饰的交叉调控可能代表更广泛的RNA代谢干预靶点，这为克服肿瘤异质性耐药开辟了新思路。